Wako LabAssay(TM)系列定量檢測試劑盒 - 細胞生物學用
LabAssay(TM)系列定量檢測試劑盒 - 細胞生物學用
編號
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名稱
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容量
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292-63901
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LabAssay (TM) A/G 白蛋白與球蛋白比值檢測試劑盒
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1000 Test
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290-65901
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LabAssay (TM) Creatinine 肌氨酸酐定量檢測試劑盒
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500 Test
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298-65701
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LabAssay (TM) Glucose 葡萄糖定量檢測試劑盒
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1000 Test
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294-63601
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LabAssay (TM) NEFA 游離脂肪酸定量檢測試劑盒
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750 Test
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296-63801
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LabAssay (TM) Phospholipid 磷脂定量檢測試劑盒
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1300 Test
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290-63701
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LabAssay (TM) Triglyceride 甘油三酯定量檢測試劑盒
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1000 Test
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291-58601
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LabAssay (TM) ALP 堿性磷酸酶定量檢測試劑盒
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900 Test
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294-65801
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LabAssay (TM) Cholestero 膽固醇定量檢測試劑盒
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1000 Test
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292-64001
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LabAssay (TM) Uric Acid 尿酸定量檢測試劑盒
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1300 Test
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LabAssay (TM) ALP堿性磷酸酶定量檢測試劑盒 Alkaline Phosphatase Assay Kit
產品摘要
堿性磷酸酶的活性檢測試劑盒。常用于檢測培養的成骨細胞、實驗動物血清和骨組織中的堿性磷酸酶活性。
堿性磷酸酶(ALP)廣泛分布于肝臟、骨、小腸之中。特別在骨代謝研究領域方面被用作為骨形成指標之一。本品是用p–硝基苯磷酸作為底物的堿性磷酸酶檢測試劑盒,利用微孔板,可進行多種樣品的檢測。
檢測原理
樣品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸鹽緩沖液(pH9.8)中反應,在樣品中的堿性磷酸酶作用下,p-硝基苯磷酸分解為p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚為堿性,呈黃色。根據測量其405nm的吸光值,計算出樣品中堿性磷酸酶的活性。
LabAssay(TM)ALP [p-硝基苯磷酸基質法]
性能
■檢測范圍:>0.06 mmol/L
■標準曲線范圍:0~0.5 mmol/L
■再現性:C.V.<10%
■標準曲線范圍:0~0.5 mmol/L
■再現性:C.V.<10%
試劑盒組成
■底物---------------------20片(溶解時:p-硝基苯磷酸二鈉 6.7mmol/L)
■底物溶解液-------100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化鎂含有0.1mol/L碳酸鹽緩沖液pH9.8)
■反應終止液-------100ml×1瓶(0.2mol/L氫氧化鈉溶液)
■標準液---------------10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)
■底物溶解液-------100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化鎂含有0.1mol/L碳酸鹽緩沖液pH9.8)
■反應終止液-------100ml×1瓶(0.2mol/L氫氧化鈉溶液)
■標準液---------------10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)
試劑的配制
1)底物緩沖液:1片底物溶解于5mL底物溶解液中。
2)反應終止液:直接使用。
3)系列稀釋標準液:將標準液用蒸餾水依次稀釋為0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀釋液系列。
2)反應終止液:直接使用。
3)系列稀釋標準液:將標準液用蒸餾水依次稀釋為0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀釋液系列。
標準操作法
向96孔微孔板內添加100μl底物緩沖液和20μl樣品,在微孔板震蕩器上充分振蕩1分鐘后,37℃孵育15分鐘。添加80μl反應終止液,在微孔板震蕩器上充分振蕩1分鐘后,用酶標儀測量405nm處的吸光值。同樣方法進行空白(蒸餾水)對照和標準品的檢測。
活性單位的定義
在pH9.8,37℃情況下,1分鐘內生成1nmol p-硝基酚所需的酶的活性為1個活力單位(U)。
活性(U/μl)= C/15 ×a
C:由標準曲線得到的OD值(A實驗值減去A空白值),計算p-硝基酚濃度(mmol/L=nmol/μl) 15:反應時間(min.)
a:樣品的稀釋倍數
C:由標準曲線得到的OD值(A實驗值減去A空白值),計算p-硝基酚濃度(mmol/L=nmol/μl) 15:反應時間(min.)
a:樣品的稀釋倍數
當樣品為成骨細胞時,本試劑盒使用前需要預處理
■在48孔板上進行細胞培養后,除去培養基,用PBS沖洗感光板,各孔添加150μl 0.05%的曲拉通X,進行凍結→融化→凍結→融化操作。4℃,15,000rpm離心15分鐘處理,將上清液移到新的輔助管,以此作為樣品。
(注1)48孔板:培養時,一般不采用96孔板,多使用48孔板。
(注2) 曲拉通X的作用:溶解細胞膜,回收蛋白(細胞內含有ALP蛋白)的試劑。
(注3) 反復的凍結融化:原理不明,但這樣做似乎可以提高ALP活性。
(注4) 也有不使用曲拉通X,用超聲波降解法(超聲波處理)對細胞造成物理性休克得到溶解產物的方法。
(注5) 曲拉通X的添加量:以150μL為例,孔中細胞約為20,000cell。
(注2) 曲拉通X的作用:溶解細胞膜,回收蛋白(細胞內含有ALP蛋白)的試劑。
(注3) 反復的凍結融化:原理不明,但這樣做似乎可以提高ALP活性。
(注4) 也有不使用曲拉通X,用超聲波降解法(超聲波處理)對細胞造成物理性休克得到溶解產物的方法。
(注5) 曲拉通X的添加量:以150μL為例,孔中細胞約為20,000cell。
產品編號
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品名
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規格
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容量
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291-58601
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LabAssay (TM) ALP
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細胞生物學
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900次
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LabAssay(TM)A/G[BCG法、雙縮脲法]
本品是包含總蛋白顯色劑(基于雙縮脲法)、白蛋白顯色劑(基于BCG法)、標準血清的檢測試劑盒。可同時檢測總蛋白及白蛋白濃度,計算出白蛋白/球蛋白比。
特點
〈白蛋白〉
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.120~0.220。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±12%以內。
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.120~0.220。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±12%以內。
〈總蛋白〉
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.050~0.100。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±10%以內。
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.050~0.100。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±10%以內。
試劑盒組成
■白蛋白顯色劑-------------250ml×1瓶
■總蛋白顯色劑---------- --250ml×1瓶
■標準血清---------------------3ml用×1瓶
■白蛋白修正緩沖液--------25ml×1瓶
■總蛋白顯色劑---------- --250ml×1瓶
■標準血清---------------------3ml用×1瓶
■白蛋白修正緩沖液--------25ml×1瓶
產品編號
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品名
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規格
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容量
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292-63901
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LabAssay (TM) A/G
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細胞生物學
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1,000次
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LabAssay(TM)膽固醇[膽固醇氧化酶、DAOS法]
膽固醇是動脈硬化等血管疾病的致病原因之一。
試劑盒組成
■緩沖液-----------------------------150ml×2瓶(MES緩沖液)
■顯色劑----------------------150ml用×2瓶 (溶解時:膽固醇酯酶,膽固醇氧化酶,過氧化物酶,DAOS,4-氨基安替比林,抗壞血酸氧化酶)
■標準液---------------------------10ml用×1瓶
性能
【靈敏度】 蒸餾水作為樣品時,吸光值在0.11以下。 特定濃度的標準液(200mg/dl) 作為樣品時,吸光值為0.13~0.65。
【特異性】 可檢測1,000mg/dl的總膽固醇濃度。
【檢測波長】 主波長:600nm, 副波長:700nm
試劑的配制
顯色劑:將1瓶顯色劑(150mL用)溶解于1瓶緩沖液(150mL)中。 配制后,以2~10℃保存,可保存3星期。
標準操作法
向微孔板內添加2μl樣品和300μl顯色劑,充分混合,在37℃孵育5分鐘。以此作為對照空白值,測量樣品及標準液的吸光值。
產品編號
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品名
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規格
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容量
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294-65801
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LabAssay (TM) Cholesterol
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細胞生物學
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1,000次
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LabAssay(TM) 肌氨酸酐[Jaffe'法]研究試劑
肌氨酸酐是由存在于肌肉、神經內的磷酸肌酸直接產生,或由肌酸脫水產生,經腎毛細血管球過濾后被排除體外的代謝產物。利用Jaffe法,在堿性條件下,通過檢測苦味酸與肌氨酸酐反應生成的橙紅色色素檢測樣品中肌氨酸酐含量。
特點
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.010~0.020。
■使用已知濃度的血清進行檢測時,在已知濃度的±10%以內。
■使用已知濃度的血清進行檢測時,在已知濃度的±10%以內。
試劑盒組成
■除蛋白劑…150ml×1瓶
■苦味酸…50ml×1瓶
■0.75mol/L 氫氧化鈉溶液…50ml×1瓶
■標準液 (肌氨酸酐10mg/dl)…15ml×1瓶
■苦味酸…50ml×1瓶
■0.75mol/L 氫氧化鈉溶液…50ml×1瓶
■標準液 (肌氨酸酐10mg/dl)…15ml×1瓶
試劑的制備
●除蛋白劑,苦味酸,0.75mol/L 氫氧化鈉溶液:全部都可以直接使用.
●標準液: 附帶的標準液可直接使用,或稀釋后作為系列標準液。
●標準液: 附帶的標準液可直接使用,或稀釋后作為系列標準液。
標準操作法
將300μl除蛋白劑和50μl樣品在樣品管中混合,室溫放置10分鐘,離心分離(2,500rpm以上反應10分鐘),回收上清。
向酶標板的孔中加入100μl上清,再加入50μl苦味酸和50μl 0.75mol/L氫氧化鈉溶液,在25~30℃反應20分鐘。
作為空白對照,檢測樣品及標準液的吸光值。
向酶標板的孔中加入100μl上清,再加入50μl苦味酸和50μl 0.75mol/L氫氧化鈉溶液,在25~30℃反應20分鐘。
作為空白對照,檢測樣品及標準液的吸光值。
檢測波長
520nm
產品編號
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品名
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規格
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容量
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290-65901
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LabAssay (TM) Creatinine
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細胞生物學
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500次
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LabAssay (TM)尿酸[尿酸酶、TOOS法]
與微孔板配套使用,可用于小鼠血清中尿酸的檢測。
特點
■蒸餾水作為樣品時,吸光值為0.15以下。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±15%以內。
■測量已知濃度的血清時,結果在已知濃度的±15%以內。
試劑盒組成
■緩沖液----------------100ml×4瓶(磷酸緩沖液(pH6.4),TOOS)
■顯色劑------------100ml用×4瓶 (溶解時:尿酸酶,過氧化物酶,4-氨基安替比林,脂蛋白脂肪酶,抗壞血酸氧化酶)
■尿酸標準液------------10ml×1瓶
■顯色劑------------100ml用×4瓶 (溶解時:尿酸酶,過氧化物酶,4-氨基安替比林,脂蛋白脂肪酶,抗壞血酸氧化酶)
■尿酸標準液------------10ml×1瓶
試劑的配制
顯色劑:將1瓶顯色劑(100mL用)溶解于1瓶緩沖液(100mL)中。配制后,2~10℃保存,可保存3星期。
標準操作法
向微孔板內添加5μl樣品和300μl顯色劑,充分混合,37℃孵育5分鐘。以此作為空白對照值,測量樣品及標準液的吸光值。
檢測波長
主波長555nm(副波長700nm)
性能
蒸餾水測量時的吸光值<0.15。
特定濃度標準液(尿酸10mg/dL)測量時的吸光值為0.04~0.26。
特定濃度標準液(尿酸10mg/dL)測量時的吸光值為0.04~0.26。
產品編號
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品名
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規格
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容量
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292-64001
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LabAssay (TM) Uric Acid
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細胞生物學
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1,300次
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