酵母（S.cerevisiae ）直接轉(zhuǎn)化試劑盒

來源：Seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發(fā)表時(shí)間：2012-02-09 14:51:00【大中小】

酵母（S.cerevisiae ）直接轉(zhuǎn)化試劑盒

本品為出芽酵母（Saccharomyces cerevisiae）轉(zhuǎn)化試劑盒。無需預(yù)先進(jìn)行菌體離心、洗凈操作，可直接向酵母培養(yǎng)液加入目標(biāo)質(zhì)粒和專用試劑，是一步即可完成轉(zhuǎn)化的試劑。值得一提的是利用96孔板可導(dǎo)入多種檢體，簡單加入4850種重組體也成為可能，因而可進(jìn)行染色體的篩選。

[特點(diǎn)]
·加入了目標(biāo)質(zhì)粒和專用試劑的一步完成型。
·感受態(tài)細(xì)胞無需調(diào)制。
·使用96孔板可進(jìn)行多檢體處理。
·適應(yīng)HT的低粘性試劑。

[轉(zhuǎn)化效率]
向BY4737株導(dǎo)入pRS316時(shí)的轉(zhuǎn)化效率。

	形質(zhì)轉(zhuǎn)化效率 (cfu/μg)
軟管法	≥5,000
96孔感光板法	≥500

[試劑盒內(nèi)容]

	20次用	100次用	500次用
Sc Transformation Reagent	500μl	2.5ml	12.5ml
Carrier DNA(5μg/μl)	50μl	250μl	1.25ml

[操作方法]
■ 軟管法

<酵母的培養(yǎng)>
2ml YPD培養(yǎng)基
↓←菌種接入，調(diào)制至OD₆₀₀：0.01
↓←取1ml至14ml的試管中
↓←在28~30℃振蕩培養(yǎng),至OD₆₀₀：3.5~5.0
培養(yǎng)酵母液……（A）

<轉(zhuǎn)化>
1.5ml的離心管
↓←將25μl質(zhì)粒和試劑混合液混合
↓←加入25μl培養(yǎng)酵母液（A）在42℃恒溫箱中放置2小時(shí)
↓←加入150μl滅菌水

預(yù)處理
↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3天
轉(zhuǎn)化后的酵母

■ 96孔板法

96孔板
↓←加入25μl YPD培養(yǎng)基
菌種接入
↓在28~30℃情況下靜置培養(yǎng)18~24
菌體懸濁
↓←將25μl質(zhì)粒和試劑混合液混合
在37℃的恒溫箱中放置2小時(shí)
5~10μl spotting
↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3日
轉(zhuǎn)化的酵母
*質(zhì)粒·試劑混合液 (25μl /管, 25μl/孔)

·Sc Transformation Reagent…20μl
·質(zhì)粒DNA………………………1μg
·Carrier DNA……………………2μl
調(diào)制25μl滅菌水

[保存條件]

-20℃保存

[產(chǎn)品資料]

產(chǎn)品編號(hào)	品名	規(guī)格	容量
296-62701	S.Cerevisiae Direct Transformation Kit, Wako 酵母（S.cerevisiae ）直接轉(zhuǎn)化試劑盒	基因研究用	20次用
292-62703			100次用
290-62704			500次用