當(dāng)?shù)孜锇l(fā)生化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生的能量以光的形式釋放出來(lái)的時(shí)候，我們稱(chēng)這個(gè)過(guò)程為化學(xué)發(fā)光。魯米諾（luminol）是常用的化學(xué)發(fā)光試劑之一，被過(guò)氧化物氧化后它會(huì)產(chǎn)生一種激發(fā)態(tài)的產(chǎn)物--aminophthalate。這種產(chǎn)物衰變至低能態(tài)的同時(shí)釋放出光子。專(zhuān)利添加物可以提高魯米諾反應(yīng)的發(fā)光強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間（穩(wěn)定性），從而使增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光（ECL）成為可能。
  化學(xué)發(fā)光成為大多數(shù)蛋白實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)方法，其這些優(yōu)點(diǎn)如下：1、使用化學(xué)發(fā)光可以通過(guò)多次曝光獲得好的成像結(jié)果；2、可以將檢測(cè)試劑去除，再對(duì)其他目的蛋白進(jìn)行檢測(cè)并成像，或?qū)z測(cè)條件進(jìn)行優(yōu)化；3、具有很寬的線(xiàn)性響應(yīng)范圍，從而可以檢測(cè)并定量很寬濃度范圍的蛋白質(zhì)；4、化學(xué)發(fā)光在所有的檢測(cè)方法中具有高靈敏度。
  在化學(xué)發(fā)光分析中，如果再加入適當(dāng)?shù)脑鰪?qiáng)劑，則靈敏度提高且發(fā)光時(shí)間延長(zhǎng)，可改善測(cè)定的重現(xiàn)性。實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)位酚類(lèi)衍生物的發(fā)光增強(qiáng)作用明顯，其發(fā)光效率可上升幾十倍，發(fā)光時(shí)間也獲得有效延長(zhǎng)。
  吖啶酯或吖啶磺酰胺類(lèi)化合物應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA），通常采用的體系是Acridinium ester/ H₂O₂系統(tǒng)。即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標(biāo)記抗體或抗原，用HNO₃+H₂O₂和NaOH作發(fā)光啟動(dòng)試劑。有些在發(fā)光啟動(dòng)試劑中加入Triton X-100，CTAC，Tween-20等表面活性劑以增強(qiáng)發(fā)光。
  自然中廣泛分布著生物發(fā)光有機(jī)體，其中包括細(xì)菌、真菌、魚(yú)、昆蟲(chóng)等。在這些生物發(fā)光有機(jī)體中催化生物發(fā)光反應(yīng)的各種酶都稱(chēng)之為熒光素酶（Luciferases），底物則命名為熒光素（Luciferin）。D-熒光素（D-luciferin)是生物冷光檢查使用廣泛的物質(zhì)，是熒光素檢測(cè)試劑盒的核心成份，廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生、環(huán)境等領(lǐng)域。D-熒光素、D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽，作為L(zhǎng)uciferase的作用底物，常用于以下實(shí)驗(yàn)：
 1．報(bào)告基因分析
 2．動(dòng)物活體成像(In vivo imaging) 和細(xì)胞體外分析（In vitro imaging）
 3．三磷酸腺苷（ATP）測(cè)定
 4．其它 luciferase 及其基因相關(guān)的分析和研究工作
  熒光素類(lèi)和羅丹明類(lèi)是生物技術(shù)中常用的標(biāo)記染料，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)和核酸的檢測(cè)分析中，人們對(duì)其結(jié)構(gòu)和性能已經(jīng)有了深入的了解。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數(shù)高、光譜范圍廣且光量子產(chǎn)率高等特性，應(yīng)用于生物大分子熒光標(biāo)記。菁染料主要用于標(biāo)記核酸。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數(shù)高、光譜范圍廣且光量子產(chǎn)率高等特性，應(yīng)用于生物大分子熒光標(biāo)記。菁染料主要用于標(biāo)記核酸。
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