Protein A純化介質

來源：seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發表時間：2012-07-18 11:14:00【大中小】

1、產品簡介

Protein A能特異性地與抗體的Fc區結合，所以Protein A親和介質可用于抗體（單抗和多抗）的分離純化，經過一步親和層析，即可從腹水、血清和培養液等樣品中得到高純度的抗體。Protein A QZT 4FF親和介質以自制的瓊脂糖凝膠為基質，以重組Protein A為配基，具有很高的物理化學穩定性，配基不易脫落，壽命長，使用方便，應用廣泛。

2、產品特性

參數	指標
基質	4%交聯瓊脂糖凝膠
配基	r-Protein A
形狀	球形
介質平均粒徑	90 μm (45-165)
配基密度	6mg ProteinA/ml wet gel
動態載量	30-40mg rabbitIgG/ml wet gel
最高流速（25℃）	450 cm/h
推薦流速	<150 cm/h
最高耐壓	0.3 MPa (3 bar)
pH穩定性	3~10（長時間）；2~11（短時間）
保存	4~8 ^oC（20%乙醇）

3、應用

Protein A QZT 4FF廣泛用于各種抗體的分離純化。層析操作通常包括裝柱、平衡、進料、淋洗、洗脫、再生等步驟。

平衡：用5~10CV的平衡緩沖液（20 mM PB+0.15MNaCl，pH 7.0，添加適當濃度的NaCl抑制非特異性吸附）平衡層析柱，至流出液電導和pH不變（與平衡液一致）。

進料：樣品緩沖液應盡可能與平衡液一致。固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液可用平衡液透析；高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱，樣品應經離心或微濾（0.45μm）處理。進料量根據介質的載量和料液中目標蛋白的含量計算。

淋洗：上樣完畢后繼續用平衡緩沖液淋洗至基線。

洗脫：用洗脫緩沖液（20 mM乙酸鈉，pH 3.0-4.0或0.1M甘氨酸，pH 3.0）洗脫，收集流出液。洗脫后，應立刻用堿性緩沖液（如1M Tris/HCl, pH 9.0）將收集到的抗體溶液中和到中性，避免抗體失活，維持抗體的生物活性。

再生、原位清洗：介質使用數次（5-10次，具體次數與原料的種類和來源及實驗要求有關）后，需要對介質進行再生、在位清洗。

（1）用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV，然后用緩沖液洗到中性即可重復使用；

（2）也可用0.05M NaOH+1MNaCl或6M鹽酸胍淋洗柱子3-5CV，并用3~10 CV的純水沖洗，然后用緩沖液洗到中性即可重復使用。

其它注意事項：在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進入。

4、規格

貨號	13-0010
產品名稱	ProteinA親和介質
配基密度
pH穩定性	2 ~ 11
粒徑范圍(μm)	45 ~ 165
最大流速(cm/h)	400
應用	用于多種抗體的純化
規格	50mL
	250 mL
	1 L

5、特色服務

（1）提供介質篩選及工藝開發的咨詢。
（2）接受客戶委托開發各種分離介質和分離工藝。
（3）按客戶要求提供各種介質及相應規格的預裝柱。
（4）為客戶提供專業的售前和售后服務。

西寶提供的層析介質列表如下：

產品名稱	瓊脂糖親和介質（鎳）	瓊脂糖親和介質（谷胱甘肽）	瓊脂糖親和介質（肝素）	瓊脂糖親和介質（藍膠）	瓊脂糖親和介質（蛋白A）
配基密度（ml介質）	15~120mmol	20~30 mmol	5 mg	7-10 μmol	6 mg
載量（ml介質）	20~30mg（LDH）	10mg GST	2mg抗凝血酶III	20mgBSA	35mgIgG（兔）
pH穩定性	3-13	3-12	4-12	4-12	2-11
粒徑范圍(μm)	45-165	45-165	45-165	45-165	45-165
最大流速(cm/h)	500	450	500	500	450
應用	用于含組氨酸標簽蛋白的純化	用于含GST標簽蛋白的純化	用于抗凝血酶III、凝血因子及干擾素等蛋白的純化	用于白蛋白、干擾素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的純化	用于多種抗體的純化