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藍膠親和介質

來源:seebio.cn作者:西寶生物人氣:-發表時間:2012-07-18 11:18:00【

1、 概述

瓊脂糖親和介質(藍膠)通常簡稱為藍膠,它是一種染料親和介質,其配基(藍色染料Cibacron Blue F3GA)是一種多芳香環的磺化物,具有與NAD+相似的空間結構,能與各種激酶、脫氫酶、血清白蛋白、DNA聚合酶等產生親和吸附作用,從而達到分離純化的目的。

瓊脂糖親和介質(藍膠)的光學顯微鏡照

 

瓊脂糖親和介質(藍膠)以高交聯度瓊脂糖為基質,具有高機械強度、高流速的特點,非特異性吸附少,配基泄漏低,可廣泛用于蛋白純化生產領域,如用于純化磷酸激酶、水解酶、DNARNA核酸酶或聚合酶、合成酶、羥化酶、糖分解酶、磷酸二酯酶、脫羧酶以及血清白蛋白、血清脂蛋白、鐵傳遞蛋白、干擾素等蛋白分子。

西寶提供的瓊脂糖親和介質(藍膠)已被生化工程國家重點實驗室、中科院生物物理所等單位廣泛使用,應用效果良好。

2 瓊脂糖親和介質(藍膠)介質的應用

純化百日咳疫苗

 

層析柱:4.2 cm ×1.0 cmI.D.CV=3.3 ml
樣品:預處理的百日咳培養液上清(15ml
平衡緩沖液(A):20mM NaAC-HAC, pH4.5
洗脫緩沖液(B):20mM Tris-HCl, pH 8.5
洗脫緩沖液(C):20mM Tris-HCl +1MMgCl2, pH 8.5
流速:1ml/min 

上圖為采用藍膠純化雙組分百日咳疫苗的層析譜圖。經過簡單的層析分離后,目標峰(P2)中的百日咳毒素(PT)和絲狀血凝素(FHA)的純度大于85%,純化倍數分別達到了9.213.6,純化效果良好。 
 

3、規格

產品名稱

藍膠親和介質

配基密度

 

pH穩定性

4 ~ 12

粒徑范圍(μm)

45 ~ 165

最大流速(cm/h)

400

應用

用于白蛋白、需要核苷酸的酶、凝集因子等生物大分子的純化

規格

50mL

250 mL

1 L

 

西寶可以提供的親和層析列表如下:
 

產品名稱

瓊脂糖親和介質(鎳)

瓊脂糖親和介質(谷胱甘肽)

瓊脂糖親和介質(肝素)

瓊脂糖親和介質(藍膠)

瓊脂糖親和介質(蛋白A

配基密度(ml介質)

15~120mmol

20~30 mmol

5 mg

7-10 μmol

6 mg

載量(ml介質)

20~30mgLDH

10mg GST

2mg抗凝血酶III

20mgBSA

35mgIgG(兔)

pH穩定性

3-13

3-12

4-12

4-12

2-11

粒徑范圍(μm)

45-165

45-165

45-165

45-165

45-165

最大流速(cm/h)

500

450

500

500

450

應用

用于含組氨酸標簽蛋白的純化

用于含GST標簽蛋白的純化

用于抗凝血酶III、凝血因子及干擾素等蛋白的純化

用于白蛋白、干擾素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的純化

用于多種抗體的純化

 
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