肝素親和純化介質

來源：seebio.cn作者：西寶生物人氣：-發表時間：2012-07-18 11:24:05【大中小】

1、概述
瓊脂糖親和介質（肝素）主要用于分離純化抗凝血酶III或人凝血因子，也可用于分離純化某些生長因子（如重組人酸性成纖維細胞生長因子、重組人血管內皮生長因子、重組鼠肝素輔因子II以及重組人角質細胞生長因子等）以及部分酶或蛋白（如核酸結合酶、眼鏡蛇毒蛋白酶、眼鏡蛇毒纖維蛋白原溶解因子以及鹽源山蛭抗凝血蛋白、巖棲蝮蛇類凝血酶乳鐵蛋白等）。

2、瓊脂糖親和介質（肝素）的應用

純化轉基因羊奶中的抗凝血酶III（AT-III）

層析柱：2.5 cm ×1.0 cmI.D.，CV=2 ml
樣品：預處理的轉基因羊奶（0.45μm濾膜過濾，上樣10ml）
平衡緩沖液（A）：50mM Tris/Hcl, pH 7.2
洗脫緩沖液（B）：50mM Tris/Hcl+1MNaCl, pH 7.2
流速：1ml/min
1. 本介質的洗脫峰P1
2.本介質的洗脫峰P2
3. 進口介質的洗脫峰P1
4. 進口介質的洗脫峰P2

上圖為瓊脂糖親和介質（肝素）純化轉基因羊奶中的抗凝血酶Ш的層析譜圖和電泳分析圖，結果顯示，與同類進口介質相比，西寶提供的介質對抗凝血酶Ш具有相當的純化效果。

純化血漿中的抗凝血酶III

A:西寶提供的介質 B：進口介質

層析柱：2.5 cm ×1.0 cmI.D.，CV=2 ml
樣品：預處理的血漿（0.45μm濾膜過濾，上樣10ml）
平衡緩沖液：50mM Tris/Hcl, pH 7.2
洗脫緩沖液：50mM Tris/Hcl+1MNaCl, pH 7.2
流速：1ml/min

上圖為采用瓊脂糖親和介質（肝素）和同類進口介質純化血漿中抗凝血酶Ш的結果。如圖所示，P1、P2和P3分別為穿透峰、淋洗峰和洗脫峰（目標組分）?？梢钥闯霰窘橘|與進口介質的層析行為相似，淋洗峰和洗脫峰具有對稱性好、峰窄的特點；經檢測，分離出的目標組分的純度和回收率與進口介質的結果相當。

3、規格


產品名稱	肝素親和介質
配基密度
pH穩定性	4 ~ 12
粒徑范圍(μm)	45 ~ 165
最大流速(cm/h)	400
應用	用于抗凝血酶III和其他含有類似氨基酸序列的蛋白的純化
規格	50mL
	250 mL
	1 L

西寶提供的層析介質列表如下

產品名稱	瓊脂糖親和介質（鎳）	瓊脂糖親和介質（谷胱甘肽）	瓊脂糖親和介質（肝素）	瓊脂糖親和介質（藍膠）	瓊脂糖親和介質（蛋白A）
配基密度（ml介質）	15~120mmol	20~30 mmol	5 mg	7-10 μmol	6 mg
載量（ml介質）	20~30mg（LDH）	10mg GST	2mg抗凝血酶III	20mgBSA	35mgIgG（兔）
pH穩定性	3-13	3-12	4-12	4-12	2-11
粒徑范圍(μm)	45-165	45-165	45-165	45-165	45-165
最大流速(cm/h)	500	450	500	500	450
應用	用于含組氨酸標簽蛋白的純化	用于含GST標簽蛋白的純化	用于抗凝血酶III、凝血因子及干擾素等蛋白的純化	用于白蛋白、干擾素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的純化	用于多種抗體的純化

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