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NK 細胞抑制劑 Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

來源:作者:人氣:-發表時間:2023-11-03 09:08:00【
reprocell.jpgNK 細胞抑制劑
Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)
糖脂神經節苷脂GM1(ASGM1)在感染病毒時的T細胞及自然殺傷(NK)細胞中表達。ASGM1局部存在于NK和CD8(+)細胞的脂筏結構中,抗Asialo- GM1抗體可降低在各種小鼠、大鼠中的NK細胞活性。
接種抗Asialo-GM1抗體至實驗動物,去除NK細胞,用于NK細胞的功能分析或移植其他物種來源的腫瘤組織至小鼠體內1)2)
ASGM1也在嗜堿性細胞中表達,有報告稱,抗Asia-GM1抗體也可用于去除嗜堿性細胞3)
■ 參考文獻
1) Kasai M., Iwamori M., Nagai Y., Okumura K., and Tada T. : J. Immunol., 10, 175 (1980).
2)Habu S., Fukui H., Shimamura M., Kasai M., Nagai Y., Okumura K., and Tamaoki N. : J. Immunol., 127, 34 (1981).
3)Hideto, N., Kaori, M., Yohei, K., Yoshiyuki, M., and Hajime K., .: J. Immunol., 186, 10, 5766(2011)
◆原理介紹
Anti Asialo-GM1(Rabbit)抗血清可以減少大鼠或者小鼠來源的自然殺傷細胞(NK 細胞)的活性。該抗體可以與 NK 細胞發生特異性結合,從而抑制 NK 細胞非特異性殺傷靶細胞的活性。NK 細胞是一種免疫監視細胞,其靶細胞包括腫瘤細胞、同種異體移植的器官、組織等。可運用于藥物篩選,器官移植,自身免疫疾病等研究。
每個產品有具體的體內外的滴定數據。
◆特點
● 已經體內NK細胞活性驗證
● 眾多文獻應用案例
 特性
抗Asialo-GM1抗體、凍干品
 免疫方法
牛腦組織純化的Asialo-GM1甲基化BSA(bovine   serum albumin),與FCA(Freund’s complete adjuvant)同時對兔免疫。
 純化方法
50%硫酸銨鹽化后,使用含有磷酸緩沖液(pH=7.2)的生理鹽水透析。
 特異性
與小鼠、大鼠的NK細胞以及小鼠胚胎胸腺細胞反應。
 復溶
請在1 mL蒸餾水中復溶。建議使用磷酸緩沖液(pH 7.2)進行稀釋。
 接種方法
一只小鼠靜脈注射10~50 μL。
◆注射方法
小鼠-靜脈注射:
10-50 μL(推薦 20 μL)具體劑量由滴度和規格而定。第一次注射在4天內有效,因此兩周內需要注射3-4次。
大鼠-靜脈注射:
50-250 μL(小鼠劑量的4或5倍)具體劑量還須考慮大鼠的健康狀況、體重和 NK 活性。
小鼠和大鼠-腹腔給藥:
同等劑量或多于靜脈注射。
◆產品信息
制備:
從牛腦組織里提純的 Asialo-GM1 與甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐劑一起使用,可進行反復免疫。用含有磷酸緩沖鹽水(ph7.2)的 50% 硫酸銨透析后,得到血清里的丙種球蛋白(Gammaglobulin)片段。
內容:
含有唾液酸抗體 GM1 的兔血清 50% 硫酸銨鹽析分層物(含蛋白量約 10 mg/mL)。
提純法:
50% 的硫酸銨鹽析后 ,用含有磷酸緩沖液的生理鹽水透析,然后凍干。
特異性:
作用于小鼠和大鼠的自然殺傷細胞;小鼠單核細胞(是一種不含自然殺傷細胞、骨髓、胎兒肝細胞和裸鼠脾臟巨噬細胞的肝細胞);小鼠胎兒胸腺細胞(12日齡;生存率不斷降低直到沒有出現新生小鼠)(備注:如果濃度高,也能作用于成熟的T淋巴細胞)
免疫球蛋白類型:
IgG、IgA 和 IgM
重組:
建議用蒸餾水(1 mL)。由于該產品是使用鹽來進行凍干的,如果用其它溶劑如 PBS 或 MEM,就能增加其鹽濃度。
抗體滴度:
通過免疫凝聚實驗得出結果,抗體滴度比例約 1 : 1,000
保存方法:
存儲在2~10℃下
包裝規格:
1mL樣瓶
形狀:
干凍品
014-09801(986-10001)
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◆應用案例
 適用的動物模型
 運用
 腫瘤動物模型
 與抗腫瘤藥物混合后注入腫瘤動物模型內,研究抗腫瘤藥物的作用機理。
 肝纖維化動物模型
 與治療肝纖維化的藥物混合后注入動物模型體內,研究抗肝纖維化藥物的作用機理。
 器官移植動物模型
 器官移植后,會產生免疫排斥反應,機體內的免疫監視會清除”異己“的細胞和器官。
 可用于研究器官移植后使用的免疫抑制劑的作用機理
 自身免疫疾病動物模型
 研究治療自身免疫疾病藥物的作用機理。
 干細胞動物模型
 抑制 NK 細胞的活性,從而有利于干細胞動物模型的建立。
 糖尿病動物模型
 研究炎癥與糖尿病的關系。
◆抗Asialo-GM1抗體體外活性
向抗Asialo-GM1抗體中添加豚鼠來源補體,并在BALB/c小鼠的胰腺細胞中進行處理。通過靶向YAC-1細胞(●)體外檢測NK活性。
效應子/靶標的比率為50:1,○表示補體處理后BALB/c小鼠胰腺細胞的NK活性。
※ BALB/c小鼠經聚(I:C)鈉鹽100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)處理后,正常飼養18小時后開始下一步操作。
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◆抗Asialo GM1抗體體內活性
向BALB/c小鼠腹腔內注射抗Asialo-GM1抗體,并檢測單次給藥(效應子/靶標= 50:1)3天后收集的胰腺細胞對YAC-1細胞的腫瘤溶解度。
※ BALB/c小鼠經聚(I:C)鈉鹽100 μg(0.2 mL的500 μg/ mL)處理后,正常飼養18小時后開始下一步操作。
■ 對照:正常兔血清
腹腔注射量
腫瘤溶解度(%)
100 μL
70.8
■ 抗Asialo-GM1抗體
腹腔注射量
腫瘤溶解度(%)
10 μL
7
25 μL
8.4
50 μL
2
100 μL
0
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產品編號 產品名稱 產品規格 產品等級
014-09801(986-10001) Anti asialo GM1 (Rabbit) 
NK細胞抑制劑
1 mL for Immunochemistry

 

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