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TdB Antonia Red(TM)標記賴氨酸-葡聚糖

來源:作者:人氣:-發表時間:2020-05-07 16:51:00【
TdB葡聚糖衍生物
Antonia Red™ 標記賴氨酸-葡聚糖
Antonia Red™是一種新型紅移染料,最大吸收在583nm,最大發射波長在602 nm。Antonia Red-Antonia Red™標記賴氨酸-葡聚糖, 可以簡便地與生物分子和表面結合,有效固定在細胞和組織上。
嚴格控制每個批次的分子量,外觀,溶解度,取代度,熒光和游離染料。TdB生產分子量4kDa到150kDa Antonia Red™標記賴氨酸-葡聚糖。 Antonia Red™標記賴氨酸-葡聚糖是一種紫色粉末。
活體/固定
活體/固定
結構
賴氨酸-葡聚糖是由來源于腸系膜白串珠菌的特定葡聚糖片段通過賴氨酸標記而來,然后在溫和的條件下用Antonia Red染料標記制得Antonia Red™ 標記賴氨酸-葡聚糖。經過純化,嚴格控制每個批次的分子量,外觀,溶解度,取代度,PH和游離賴氨酸和游離染料。 產品是由所采用的葡聚糖片段的相近分子量來標識。例如,Antonia Red Lysine dextran 4 的分子量大約是 4000 Da。實際分子量通過GPC檢測確定。來自腸系膜白串珠菌B-512F 的葡聚糖本質上是一種線性α-(1 - 6)鏈接葡萄糖,不過含有較低比例 (2-5%)沿著主鏈分布的 α-(1-3)側鏈。通過GPC, 旋光性,吸光度和其他控制參數來嚴格控制獲得分子量范圍4000到500000Da的葡聚糖片段。
Antonia Red-lysine-dextran的結構式
Fig. 1. Antonia Red-lysine-dextran的結構式
光譜數據
Antonia Red™標記賴氨酸-葡聚糖在pH9.0硼酸緩沖液中最大吸收波長為583 nm,最大發射波長為602 nm。
物理性質
Antonia Red-標記賴氨酸-葡聚糖是由TdB開發和生產的,類似Texas Red的紅移染料。 Antonia Red-標記賴氨酸-葡聚糖為紫色粉末,極易溶于水和電解質溶液,不溶于大多數有機溶劑,例如乙醇,甲醇,丙酮,氯仿,乙酸乙酯等。取代度 (DS)介于0.01-0.02 (mol賴氨酸/mol葡萄糖)和0.001-0.01 (mol Antonia Red/mol葡萄糖)。
H9.0的硼酸鹽緩沖液中Antonia Red標記賴氨酸葡聚糖的熒光圖譜
Fig. 2. 在 pH 9的0.025M 硼酸緩沖液中的Antonia Red Lysine Dextran 70熒光圖譜。激發波長 583nm, 發射波長602nm
儲存和穩定性
雖然對于Antonia Red-標記賴氨酸-葡聚糖穩定性的前瞻性研究未見報道,但根據賴氨酸與葡聚糖鏈的酰胺化學鍵,以及賴氨酸與Antonia Red間的共價鍵的結構性質判斷,該物質具有較好的穩定性。若容器密封完好,室溫干燥條件下,Antonia Red(TM)標記葡聚糖可以穩定保持6年。
應用
攜帶氨基基團的葡聚糖,作為生物結合和活體固定的工具,對于科學界而言價值非凡。賴氨酸結構中的游離氨基可以與激活的基團以共價鍵結合,例如NHS酯或異氰酸酯,或者,與羧酸通過常規的肽偶聯劑偶聯,例如DCC,HOBt 以及HATU。 細胞和組織固定,使組分保持“類活體態”,并保持細胞滲透性,允許抗體可以進入細胞結構內,應用舉例,用于顯微研究和免疫轉染。賴氨酸結合葡聚糖通過與固定劑反應(本文使用的是甲醛或戊二醛),與類似蛋白質和脂質體的生物大分子形成共價交聯,使整個體系和葡聚糖固定。這個在分子成像定性或定量評估生物事件時,具有十分獨特的重要意義。如果沒有固定,在活體系統內的這些結構將迅速分散和分解。Antonia Red是一種熒光染料,最大激發波長為583nm,最大發射波長為602 nm, 與通用的Texas Red染料十分類似(圖3)。Antonia Red(TM)標記賴氨酸-葡聚糖很容易與生物分子結合,可使細胞保持“類活體”。 Antonia Red具有明亮的熒光,擁有良好的光/化學穩定性,對pH條件沒有依賴性。
尼康TE2000-U顯微鏡下的巨噬細胞RAW264.7圖示
圖3 尼康TE2000-U顯微鏡下的巨噬細胞RAW264.7圖示,來自Antonia Red標記賴氨酸-葡聚糖(左)的信號優于賴氨酸固定的Texas Red標記葡聚糖(右)。Antonia Red-dextran具有較好的熒光信號,較少聚集,較少游離染料和良好的細胞吸收。
產品列表
產品編號
品名
分子量(kDa)
包裝
Antonia Red™-lysine-dextran 4
4
50 mg
Antonia Red™-lysine-dextran 20
20
10 mg
50 mg
Antonia Red™-lysine-dextran 40
40
10 mg
50 mg
Antonia Red™-lysine-dextran 40
70
10 mg
50 mg
Antonia Red™-lysine-dextran 150
150
10 mg
50 mg
參考文獻
(a) Henley JR, Krueger EW, Oswald BJ, McNiven MA, J Cell Biol (1998) 141:85-99;
(b) Fritzsch B, Christensen MA, Nichols DH; J Neurobiol. 1993 Nov;24(11):1481-99;
(c) Fritzsch B., J Neurosci Methods (1993) 50:95-103
(d) Gustafsson, S. et al. Blood-brain barrier integrity in a mouse model of Alzheimer’s disease with or without acute 3D6 immunotherapy. Neuropharmacology 143, 1-9 (2018).
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