讓IPSCs也瘋狂的雞尾酒CEPT Cocktail

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-09-19 15:39:00【大中小】

CEPT是美國國立衛生研究院（NIH）開發的小分子混合物。由4種成分組成，并取其組成成分（Chroman 1、Emricasan、Polyamines、Trans-ISRIB）的開頭字母命名為“CEPT”。

研究表明，CEPT可防止人ES/iPS細胞（人多能干細胞；hPSCs）在細胞傳代中的細胞應激和DNA損傷。與強效ROCK抑制劑Y-27632相似，可提高細胞傳代和凍存時hPSCs的存活率。

此外，與基于hPSCs的胚狀體和類器官形成、單細胞克隆和基因編輯等干細胞研究中所用的現有培養方法相比，CEPT還可改善細胞存活率。

FUJIFILMWako已上線經無菌測試且無需制備的即用型CEPT Cocktail溶液。本產品為經過濾器滅菌的溶液，可直接添加至培養基使用。有助于再生醫療研究。

◆ 特點

◆ 測試項目

◆ 使用方法

以1/1,000的量添加本品至培養基，充分混合后使用。

※使用注意

（沉淀于37°C下靜置1~2 h可能會溶解，請避免反復冷凍和加熱。）

◆ 適用范圍

樣品：人ES/iPS細胞
應用：

◆ 性能數據

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培養基，在37°C，5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株（6孔板 1 well=9.5cm2）。

培養經過16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養基，每2-3天更換培養基，繼續培養。

培養第8天時，確認細胞后，使用4%多聚甲醛固定細胞，ALP染色后，計數細胞集落。

單細胞克隆測試

添加CEPT或Y-27632至含bFGF的StemSure®hPSCΔ培養基，在37°C，5% CO2的條件下培養人iPS細胞201B7株（96孔板）。

培養經過16 h以后，更換不含CEPT或Y-27632的培養基，每2~3天更換培養基，繼續培養。

培養第13天時，確認細胞后，使用4%多聚甲醛固定細胞，ALP染色后，計數形成細胞集落的孔數與空孔數。

通過所有孔數與細胞集落形成孔數之比，計算細胞集落形成率。

【結果】

細胞接種數少時，添加CEPT的組比添加Y-27632的組形成的細胞集落更多。

未分化人iPS細胞的維持確認

【細胞株】人iPS細胞201B7株

【培養基】StemSure®hPSC培養基Δ+35ng/mL bFGF

Red: rBC2LCN-635（人iPS細胞膜染色）

Blue:DAPI (細胞核染色)

※BC2LCN是一種對存在與人ES/iPS細胞的膜表面的糖鏈具有高親和性的重組凝集素

添加CEPT時

添加Y-27632時

【結果】

添加CEPT時與添加Y-27632時都未觀察到細胞形態的差異，均可確認未分化維持狀態。

◆ 產品列表

產品編號	產品名稱	產品等級	產品規格
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×) CultureSure™ CEPT混合物（1,000×）	細胞培養用	300 μL

相關產品

產品編號	產品名稱	產品等級	產品規格
197-17571	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干細胞培養基	細胞培養用	100 mL
193-17573	StemSure®hPSC Medium Δ StemSure®人多能干細胞培養基	細胞培養用	100 mL×4
062-06661	bFGF Solution, MF 成纖維細胞生長因子溶液（堿性）	細胞培養用	50 μL
068-06663	bFGF Solution, MF 成纖維細胞生長因子溶液（堿性）	細胞培養用	50 μL×4
195-16031	StemSure®Freezing Medium StemSure®細胞凍存液	細胞培養用	100 mL
192-19081	StemSure®hPSC Remover (rBC2LCN-PE38 ) StemSure®hPSC未分化干細胞清除劑	細胞培養用	100 μL
035-24593	CultureSure®10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free CultureSure®10mmol/l Y-27632 溶液，無動物源	細胞培養用	1 mL
039-24591		細胞培養用	300 μL
259-00613	Y-27632, MF 選擇性強效ROCK抑制劑	細胞培養用	5 mg
257-00614	Y-27632, MF 選擇性強效ROCK抑制劑	細胞培養用	25 mg
030-24021	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（選擇性ROCK抑制劑）	細胞培養用	1 mg
036-24023			5 mg
034-24024			25 mg
030-24026			100 mg