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培養細胞凍存液COS banker系列

來源:作者:人氣:-發表時間:2024-03-18 15:36:00【
0715519396055346.png可用于iPS細胞的冷凍保存!
培養細胞凍存液COS banker系列
COS banker是不含血清和牛來源化合物的安全培養細胞凍存液。
COS banker II是為了保存過繼免疫淋巴細胞而開發的淋巴細胞凍存液。
◆特點
● 可以冷凍保存iPS細胞。
● 無需稀釋使用。
● 復蘇后的細胞存活率優異。
● "COS banker"不含動物的血清以及其他動物源成分。*1
● 為了防止其中的DMSO腐蝕PET容器,特意采用玻璃裝瓶。
*1 "COS banker II"含有GMP級人血清白蛋白的穩定劑。
圖片.png
◆實驗步驟
1. 以轉速1200 rpm/5 min對處于對數期*2的細胞進行離心操作,然后收集大約5×105~1×107個離心后的細胞。
2. 向細胞沉淀中添加1mL本產品,進行重懸后放進凍存管中,在-80°C冷凍保存。
3. 用液氮儲存時,細胞請預先在-80°C下冷凍1天以上。
4. 復蘇操作請在37°C的恒溫水浴鍋中快速進行。
*2 凍存的細胞需位于對數期,這點對于提高復蘇后的存活率至關重要。
◆規格
產品名稱
COS banker
COS banker II
產品編號
COS-CFM01
COS-CFM02
產品包裝
120mL
120mL
成分
含DMSO(含量不公開)
  不含血清
含DMSO(含量不公開)
含人血清白蛋白
不含血清
儲存方法
低溫避光保存(2~8°C)
低溫避光保存(2~8°C)
有效期
生產后2年
生產后2年
◆質量控制
檢查項目
測試方法
標準
無菌性
TGC、SCD以及培養法(日本藥典)
不生長
內毒素
動力學比色法(日本藥典)
0.3 EU/mL 以下
細胞保存性
冷凍7天后重新復蘇的細胞生存
與對照凍存液相同
◆使用案例
anker
 iPS細胞(Dotcom)、
 Daudi(人伯基特淋巴瘤)、HeLa S3(人宮頸癌)、
 K562(人慢性骨髓性白血?。?、Raji(人伯基特淋巴瘤)、
 MOLT-4(人急性淋巴細胞白血病 : T- 細胞)、
 CTLL-2(小鼠T : IL-2 依賴性)、NIH/3T3(小鼠胎兒)、
 PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤)、CHO-K1(中國倉鼠卵巢)、
 Vero細胞(非洲綠猴腎來源細胞株)、
 MDCK細胞(犬腎小管上皮細胞來源的細胞株)
 MCF-7(人乳癌) 、HepG2(人肝癌)、
 P3U1(小鼠骨髓瘤)、成纖維細胞、
 表皮角化細胞、血管內皮細胞、雜交瘤、SF9(昆蟲細胞)
COS   banker II
 人末梢血來源活化淋巴細胞、
 Daudi細胞、Raji細胞、K652細胞、
 Molt-4F細胞、CTLL-2細胞、MCF-7(人乳癌)、
 HepG2(人肝癌)、P3U1(小鼠骨髓瘤)、
 成纖維細胞、表皮角質形成細胞、血管內皮細胞、
 雜交瘤、CHO細胞(中國倉鼠卵巢來源細胞株)、
 MDCK細胞(犬腎小管上皮細胞來源的細胞株)、HeLa(人宮頸癌)、SF9(昆蟲細胞)
◆iPS細胞
【冷凍保存程序(緩慢凍結法)】
● 用CTK溶液回收細胞
● 離心(1000 rpm,5分鐘),除去上清液
● 添加COS banker,重懸細胞
● 分裝到凍存管中
● 將凍存管放入凍存盒中。
● 置于-80℃的超低溫冰箱中
● 次日將凍存管移至液氮中
222.jpg
333.jpg
圖1 iPS細胞(Dotcom)的凍存結果
左:復蘇后第二天、   右:復蘇后第六天
◆人淋巴細胞
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圖2 (左圖)不同細胞凍存液的細胞存活率比較
添加0.5 mL細胞(活細胞濃度 3×106 cells/mL)至凍存管,并儲存在-80°C中。一周/一個月/兩個月后復蘇(在37°C恒溫水槽中孵育90秒,剩余的冷凍細胞搖晃融解),測量存活率。
灰:一周后、 藍:一個月后、 黑:2個月后
 
圖3(右圖)復蘇后的細胞增殖情況
復蘇凍存了一周的淋巴細胞,將各個培養基的活細胞濃度調至20×104 cells/mL,在水浴鍋中培養。對第5天及第6天的活細胞進行計數。
◆產品列表
COS banker
不含血清和牛來源化合物的安全培養細胞凍存液。
產品編號
制造商
產品名稱
包裝
COS-CFM01
KOJ
COS banker [Cell Freezing Medium] (chemical defined)
COS banker [細胞凍存液] (化學成分明確)
120 mL
COS banker II
為了保存過繼免疫淋巴細胞而開發的淋巴細胞凍存液。
產品編號
制造商
產品名稱
包裝
COS-CFM02
KOJ
COS banker II [Cell Freezing Medium]
COS banker II [細胞凍存液]
120 mL
 
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