CTGF ELISA 試劑盒

來源：作者：人氣：-發(fā)表時間：2025-02-10 14:15:00【大中小】

CTGF ELISA 試劑盒

結(jié)締組織生長因子CTGF（Connective Tissue Growth Factor）是一種由臍靜脈和血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的約38 kDa的分泌蛋白。除了參與細(xì)胞粘附和軟骨細(xì)胞的增殖和分化以外，它也被認(rèn)為是組織纖維化的一個主要因素，還可作為纖維化疾病的候選標(biāo)志物。

FUJIFILM Wako可提供用于檢測CTGF全長的ELISA試劑盒以及檢測全長+N末端的ELISA試劑盒，通過組合使用這兩種ELISA試劑盒，能夠準(zhǔn)確檢測作為特發(fā)性肺纖維化（IPF）候選生物標(biāo)志物的血液N末端CTGF片段。

◆什么是CTGF？

CTGF（ Connective Tissue Growth Factor）是一種由臍靜脈和血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的約38kDa的分泌蛋白。它是CCN (Cyr61/CTGF /Nov)家族的一種，亦稱為CCN2。CTGF主要由Module 1 - Module 4的四個部分組成，Module 1稱為IGF結(jié)合結(jié)構(gòu)域，Module 2稱為VWC結(jié)構(gòu)域，Module 3稱為TSP-1結(jié)構(gòu)域，Module 4稱為CT結(jié)構(gòu)域。各結(jié)構(gòu)域通過與不同的因子結(jié)合來發(fā)揮作用。

CTGF在組織纖維化中發(fā)揮重要作用，因此可作為纖維化的候選生物標(biāo)志物。CTGF由TGF-β誘導(dǎo)表達(dá)，通過促進(jìn)產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)的肌成纖維細(xì)胞的分化和膠原蛋白的合成，從而參與纖維化^1）。在小鼠皮膚纖維化中，TGF-β和CTGF已被證明分別在纖維化的發(fā)生和持續(xù)中起重要作用^2）。此外，還有報告稱CTGF與軟骨細(xì)胞的增殖和分化，細(xì)胞間的粘連有關(guān)。

CTGF除了全長CTGF之外，還有Module 2 － Module 3間被切斷產(chǎn)生的N末端(Module 1-2)CTGF和C末端(Module 3-4)CTGF。由于CTGF（C末端）容易被分解，所以血液中主要以CTGF （全長）和CTGF (N末端)的形式存在。CTGF (N末端)作為特發(fā)性肺纖維化(IPF: Idiopathic Pulmonary Fibrosis)的生物標(biāo)志物備受期待³⁾，但由于CTGF（全長)和CTGF（N末端）同時存在，所以單獨檢測CTGF（N末端）非常困難。

◆試劑盒組成

96次用
抗體固相化孔板	1 plate
CTGF標(biāo)準(zhǔn)品	1支
緩沖液	20 mL
生物素結(jié)合抗體溶液	100 μL
過氧化物酶結(jié)合鏈霉親和素溶液	100 μL
TMB溶液	12 mL
反應(yīng)終止液	12 mL
清洗液（10×）	100 mL
標(biāo)準(zhǔn)品樣品制備溶液	100 mL
孔板封條	4片

◆CTGF ELISA試劑盒 Wako

FUJIFILM Wako可分別提供檢測CTGF全長以及全長+N末端的ELISA試劑盒。通過組合使用兩種ELISA試劑盒，可準(zhǔn)確檢測特發(fā)性肺纖維化(IPF)的生物標(biāo)志物——血液中的N末端CTGF⁴⁾。

產(chǎn)品系列

產(chǎn)品名稱	CTGF（全長）ELISA試劑盒 Wako	CTGF（全長+N末端）ELISA試劑盒 Wako
產(chǎn)品編號	290-84701	292-84901
檢測對象	CTGF（全長）	CTGF（全長+N末端）
檢測原理
樣品	人血清，人血漿(EDTA)
標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍	7.81-500 pM
所需樣品量	人血清：5 μL，人血漿(EDTA)：10 μL
檢測時間	2 h 50 min
檢測法	顯色法

◆性能數(shù)據(jù)

■ 全長，N末端片段，C末端片段的交叉性

分別使用各ELISA試劑盒與全長，N末端片段，C末端片段反應(yīng)，確認(rèn)其交叉性。

【結(jié)果】

CTGF（全長）ELISA試劑盒 Wako可以特異性檢測CTGF全長，CTGF（全長+N末端）ELISA試劑盒 Wako可以特異性檢測CTGF全長和N末端片段。

■ 與CCN家族的交叉性

確認(rèn)了包含CTGF在內(nèi)的與CCN家族的交叉率（500 pM，n=8）。

	CTGF ELISA（全長）交叉率 (%)	CTGF ELISA（全長+N末端區(qū)域）交叉率 (%)
CCN1	<0.5	N.D.
CCN2（CTGF）	100	100
CCN3	<0.5	N.D.
CCN4	<0.5	N.D.
CCN5	<0.5	N.D.
CCN6	<0.5	N.D.

N.D. = 未檢出

【結(jié)果】

FUJIFIM Wako的試劑盒在CCN家族中，對CCN2(CTGF)顯示高特異性。

■ 加標(biāo)回收測試

CTGF(全長+N末端) ELISA試劑盒 Wako

樣品ID	添加量 (pM)	檢測值 (pM)	回收量 (pM)	回收率 (%)
人血清樣品No.15	0	61.5	―	―
	10	71.4	9.9	99
	50	110	48.5	97
	100	163	102	102
	150	215	154	103
	300	370	309	103
			平均	101
人血漿（EDTA）樣品No.15	0	71.5	―	―
	10	80.8	9.3	93
	50	121	49.5	99
	100	174	103	103
	150	227	156	104
	300	380	309	103
			平均	100

CTGF(全長) ELISA試劑盒 Wako

樣品	添加量 (pM)	檢測值 (pM)	回收量 (pM)	回收率 (%)
人血清樣品No.16	0	37.8	―	―
	10	47	9.2	92
	50	87.4	49.6	99.2
	100	141	103	103
	150	191	153	102
	300	343	305	102
			平均	99.6
人血漿 (EDTA) 樣品No.16	0	16.9	―	―
	10	26.2	9.3	93
	50	65.6	48.7	97.4
	100	122	105	105
	150	173	156	104
	300	326	309	103
			平均	100

■ 稀釋線性測試

CTGF(全長+N末端) ELISA試劑盒 Wako

人血清	人血漿

CTGF(全長) ELISA試劑盒 Wako

人血清	人血漿

◆應(yīng)用數(shù)據(jù)

■ N末端CTGF的檢測（稀釋線性測試）

使用梯度稀釋的人血清或人血漿(EDTA)，用CTGF（全長+N末端）ELISA試劑盒 Wako檢測CTGF全長+N末端，用CTGF（全長）ELISA試劑盒 Wako檢測CTGF全長。求差值計算CTGF（N末端）量，確認(rèn)稀釋線性。

樣品	稀釋倍率	CTGF（全長＋N末端）（pM）	CTGF（全長）（pM）	CTGF（N末端）(pM）
人血清	1/1	1735	952	783
	1/2	875	495	380
	1/4	417	237	180
人血漿(EDTA)	1/1	684	126	558
	1/2	347	66.2	281
	1/4	157	34.9 * 參考值	122

【結(jié)果】

使用該方法檢測定量CTGF（N末端），可觀察到高稀釋線性。

■ 健康者和IPF患者血漿中N末端CTGF的檢測

使用CTGF（全長+N末端）ELISA試劑盒 Wako和CTGF（全長）ELISA試劑盒 Wako，檢測從健康者以及特發(fā)性肺纖維化（IPF）患者中提取的血漿（EDTA），并求出N末端CTGF的量。

健康者
ID	CTGF（全長+N末端）（pM）	CTGF（全長）（pM）	CTGF（N末端）（pM）
1	494	83.4	411
2	535	116	419
3	580	155	425
4	661	129	532
5	383	63.5	319
		mean	421
		SD	75.6

IPF患者
ID	CTGF（全長+N末端）（pM）	CTGF（全長）（pM）	CTGF（N末端）（pM）
1	1226	213	1013
2	1004	187	817
3	432	35.4	397
4	1422	278	1144
5	938	39.9	898
6	682	73.2	609
7	1123	168	955
8	849	45.5	804
9	857	60.6	796
		mean	826
		SD	221

【結(jié)果】

IPF患者血漿中N末端的CTGF量明顯高于健康者。

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品等級
290-84701	CTGF(Full) ELISA Kit Wako CTGF (全長) ELISA試劑盒 Wako	96次用	免疫化學(xué)用
292-84901	CTGF(Full+N-terminal region) ELISA Kit Wako CTGF(全長+N末端) ELISA試劑盒 Wako	96次用	免疫化學(xué)用