DNAstable and DNAstable LD 操作手冊 - 西寶生物翻譯整理

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2015-08-27 10:18:00【大中小】

DNAstable怎么用？西寶生物翻譯整理了DNAstable 和DNAstable LD的操作手冊供大家參考。

Biomatrica是一家生物穩(wěn)定技術(shù)美國高科技公司。公司位于美國加利福尼亞州的美麗海濱城市圣地亞哥。Biomatrica產(chǎn)品DNAgard Saliva, RNAstable, DNAstable, CloneStab, RNAgard, DNAgard 使研究人員，在例如藥物開發(fā)和分子診斷領(lǐng)域，以非常低廉的成本穩(wěn)定運(yùn)輸和儲(chǔ)存完整的生物樣品，并在短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)樣本活性。其Samplematrix®專有核心技術(shù)能夠在室溫下穩(wěn)定和保護(hù)生物材料。現(xiàn)在用一個(gè)信封就可郵寄過去需要大量干冰才能辦得到的事。此外，該技術(shù)也使在室溫下進(jìn)行許多生物實(shí)驗(yàn)變成了現(xiàn)實(shí)。

上海西寶生物提供進(jìn)口系列生物樣品在室溫（15-28℃）保存的穩(wěn)定劑DNAstable，可保存生物樣品可長達(dá)30年之久。

DNAstable® and DNAstable® LD操作手冊

1、樣品制備

---適用于已純化的DNA，各形式的DNA均可在DNAstable保護(hù)下長期儲(chǔ)存，包括基因組DNA、質(zhì)粒、寡核苷酸、PCR產(chǎn)物、人工染色體和復(fù)雜樣品混合DNA（例如法醫(yī)取證DNA和基因鑒定DNA樣品）。

絕大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)市售試劑盒與DNAstable是完全兼容的；為得到較佳效果，DNA樣品必須是已經(jīng)純化過的，無污染、不含活性DNA酶；
在加入到 DNAstable（干式or管式）之前，純化DNA應(yīng)懸浮在水或者TE緩沖液（10nM Tris.Cl，1mM EDTA）；
加入之前，同樣應(yīng)該確定DNA樣品濃度；雖然沒有必要，但是任然建議確立一個(gè)公式，以便以后的檢索和應(yīng)用；
為得到較佳效果，每管（孔）DNA質(zhì)量不應(yīng)超過30ug，and 不超過50ul。針對寡核苷酸，我們建議每管（孔）20ul保存，濃度≤100μM per oligo（2nmol of each oligo）。

2、樣品干燥和保存

--DNAstable 可以再室溫下保護(hù)DNA活性。每個(gè)PE管或板孔都含有DNAstable（固定在底部，粉紅色），可以保護(hù)皮克和微克級(jí)的DNA。DNAstable 是針對液體樣本的應(yīng)用，基質(zhì)溶解并在包圍樣品表面形成保護(hù)層。then 樣品需要完全干燥以便于在室溫狀態(tài)長期保護(hù)其活性穩(wěn)定。

注意：如果后期要使用分光光度計(jì)來測量樣品濃度，建議保留一個(gè)未使用的的DNAstable 管或者板孔作為空白對照。

流程：

a、確定樣品種DNA數(shù)量（μg/ml），并計(jì)算出應(yīng)加入到PE管或者板孔的體積；
b、直接加入液體樣品到PE管或者板孔；
c、混勻，避免氣泡產(chǎn)生
d、室溫（15-25℃）干燥
e、室溫儲(chǔ)存干燥的樣品、注意防潮。

建議最終體積不要超過50ul；大體積樣品需要真空干燥以保證完全干燥，我們建議使用自然干燥（層流工作臺(tái)）和真空離心干燥，所需時(shí)間見下面圖片表格。

注意：干燥需要在室溫下進(jìn)行，長時(shí)間處于潮濕環(huán)境會(huì)降低產(chǎn)品性能和保護(hù)效果。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境通常保持40-50%的相對濕度，如果超過了這一標(biāo)準(zhǔn)，我們建議您使用真空干燥裝置。

完全干燥后的樣品，需要用鋁箔袋密封。PE管式的產(chǎn)品，蓋子如果沒有受損，也可以保證密封效果。

DNAstable對溫度和濕度敏感，因此建議保存在室溫干燥環(huán)境中，長期的暴露在光照環(huán)境可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品變色，但是不影響保護(hù)效果。避光可以防止產(chǎn)品變色。

液體DNAstable（DNAstable LD）使用說明

將20ulDNAstable LD加入到1-100ul DNA樣品的水溶液或者緩沖液中（≤30μg）.上下顛倒PE管，以混勻，盡量避免產(chǎn)生氣泡。干燥過程見上述。

3、樣品復(fù)蘇

流程：

a、加入10-100ul體積的水或者緩沖液到干燥的樣品管或者板孔中；水和緩沖液的種類、體積，根據(jù)之前計(jì)算出來的DNA質(zhì)量，和具體的下游應(yīng)用來計(jì)算和選擇；
b、室溫存放15min以便完全溶解；
c、上下顛倒PE管，混勻樣品，避免氣泡；
d、未使用的溶解后樣品可以在4℃存放，或者室溫存放10天。

未使用樣品可以再次干燥并長期存放，不影響樣品穩(wěn)定性，但是建議溶解并重復(fù)干燥次數(shù)不要超過3次。

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