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二硫代蘇糖醇, DTT

來源:作者:人氣:-發(fā)表時間:2014-07-02 10:14:00【
二硫代蘇糖醇(DTT),又稱克萊蘭試劑,是一種重要的化合物,用于定量減少二硫鍵和保持還原狀態(tài)下的巰基。低濃度時,DTT可以穩(wěn)定帶有自由巰基基團(tuán)的酶,并且可恢復(fù)因體外氧化失活的基團(tuán)活性。DTT是一種很強(qiáng)的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構(gòu)象穩(wěn)定性。
DTT很容易滲透細(xì)胞膜,使其在醫(yī)藥工業(yè)中用于高收率地提取與分離蛋白質(zhì)。高濃度時,DTT是一種有效的蛋白質(zhì)變性劑,用于斷開多肽中半胱氨酸基團(tuán)的二硫鍵。
DTT的不同應(yīng)用使它在穩(wěn)定酶、抗體和生長因子時極其有價值,以及在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的各項研究中應(yīng)用廣泛。
DTT與巰基乙醇作用相似,但刺激性氣味要小很多,毒性也低很多,而效果相當(dāng)?shù)那闆r下,DTT的使用濃度比巰基乙醇低7倍,缺點是DTT價格略高一些。
 

基礎(chǔ)信息

 
產(chǎn)品名稱 DL-1,4-二硫代蘇糖醇; 1,4-二巰基蘇糖醇
英文名 DL-1,4-Dithiothreitol
別名 Dithiothreitol; threo-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol; Cleland's reagent; DTT
分子結(jié)構(gòu) DTT
分子式 C4H10O2S2
分子量 154.25
CAS 登錄號 3483-12-3
EINECS 登錄號 222-468-7
 

應(yīng)用

 
蛋白質(zhì)的大規(guī)模分離和純化,是酶、抗體和生長因子研究領(lǐng)域重要的試劑
有機(jī)合成中重要的巰基基團(tuán)保護(hù)試劑
可用于阻止蛋白質(zhì)中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間二硫鍵。
巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體,大大降低了偶聯(lián)反應(yīng)實驗(如DNA在生物感應(yīng)器中的固定)的效率;在DNA溶液中加入DTT,反應(yīng)一段時間后除去就可以降低DNA的二聚化。
疊氮化合物的還原
蛋白質(zhì)化學(xué) - 高水平的重組蛋白表達(dá)通常會產(chǎn)生蛋白質(zhì)聚集和包埋體積累。DTT在處理蛋白質(zhì)二硫鍵時,是增加蛋白質(zhì)聚集溶解度的關(guān)鍵因素。DTT裂解二硫鍵和保持相關(guān)的半胱氨酸處于還原狀態(tài),但DTT往往無法還原包埋于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)內(nèi)部的二硫鍵,此類還原常常需要先將蛋白質(zhì)變性,如高溫加熱或加入變性劑增溶緩沖液,通常包括6 M鹽酸胍或8 M尿素的變性劑,100 mM的Tris-HCl,10 – 100mM的DTT
普遍的蛋白復(fù)性方法是使用增溶緩沖液稀釋。復(fù)性緩沖液的濃度取決于0-2 M 鹽酸胍或尿素,0-2mM DTT和10-100mM的Tris HCl。緩沖液的復(fù)性可用于谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、磺基甜菜堿、環(huán)糊精、(+)-反式-1,2 -雙(巰基乙酰氨基)環(huán)己烷、三甲胺N-氧化物,和其他蛋白質(zhì),例如分子伴侶或折疊酶。在一些大規(guī)模蛋白質(zhì)折疊和純化中,DTT還用于防止不良的氧化。
 

1M DTT 溶液

 
【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進(jìn)行高壓處理。
 
產(chǎn)品訂購信息:
商品名稱 CAS號 品牌 貨號 價格(元)
DL-1,4-Dithiothreitol
1,4-二硫代蘇糖醇
3483-12-3 Seebio DCH0005I-1kg 9777.00 
DL-1,4-Dithiothreitol
1,4-二硫代蘇糖醇
3483-12-3 Seebio DCH0005I-100g 1777.00 
DL-1,4-Dithiothreitol
1,4-二硫代蘇糖醇
3483-12-3 Seebio DCH0005I-25g 554.00 
DL-1,4-Dithiothreitol
1,4-二硫代蘇糖醇
3483-12-3 Seebio DCH0005I-5g 154.00 
 
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