二硫代蘇糖醇, DTT
二硫代蘇糖醇(DTT),又稱克萊蘭試劑,是一種重要的化合物,用于定量減少二硫鍵和保持還原狀態下的巰基。低濃度時,DTT可以穩定帶有自由巰基基團的酶,并且可恢復因體外氧化失活的基團活性。DTT是一種很強的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。
DTT很容易滲透細胞膜,使其在醫藥工業中用于高收率地提取與分離蛋白質。高濃度時,DTT是一種有效的蛋白質變性劑,用于斷開多肽中半胱氨酸基團的二硫鍵。
DTT的不同應用使它在穩定酶、抗體和生長因子時極其有價值,以及在蛋白質結構分析的各項研究中應用廣泛。
DTT與巰基乙醇作用相似,但刺激性氣味要小很多,毒性也低很多,而效果相當的情況下,DTT的使用濃度比巰基乙醇低7倍,缺點是DTT價格略高一些。
基礎信息
產品名稱 DL-1,4-二硫代蘇糖醇; 1,4-二巰基蘇糖醇
英文名 DL-1,4-Dithiothreitol
別名 Dithiothreitol; threo-1,4-Dimercapto-2,3-butanediol; Cleland's reagent; DTT
分子結構
分子式 C4H10O2S2
分子量 154.25
CAS 登錄號 3483-12-3
EINECS 登錄號 222-468-7
應用
蛋白質的大規模分離和純化,是酶、抗體和生長因子研究領域重要的試劑
有機合成中重要的巰基基團保護試劑
可用于阻止蛋白質中的半胱氨酸之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。
巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體,大大降低了偶聯反應實驗(如DNA在生物感應器中的固定)的效率;在DNA溶液中加入DTT,反應一段時間后除去就可以降低DNA的二聚化。
疊氮化合物的還原
蛋白質化學 - 高水平的重組蛋白表達通常會產生蛋白質聚集和包埋體積累。DTT在處理蛋白質二硫鍵時,是增加蛋白質聚集溶解度的關鍵因素。DTT裂解二硫鍵和保持相關的半胱氨酸處于還原狀態,但DTT往往無法還原包埋于蛋白質結構內部的二硫鍵,此類還原常常需要先將蛋白質變性,如高溫加熱或加入變性劑增溶緩沖液,通常包括6 M鹽酸胍或8 M尿素的變性劑,100 mM的Tris-HCl,10 – 100mM的DTT
普遍的蛋白復性方法是使用增溶緩沖液稀釋。復性緩沖液的濃度取決于0-2 M 鹽酸胍或尿素,0-2mM DTT和10-100mM的Tris HCl。緩沖液的復性可用于谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、磺基甜菜堿、環糊精、(+)-反式-1,2 -雙(巰基乙酰氨基)環己烷、三甲胺N-氧化物,和其他蛋白質,例如分子伴侶或折疊酶。在一些大規模蛋白質折疊和純化中,DTT還用于防止不良的氧化。
1M DTT 溶液
【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸鈉溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,過濾除菌后分裝成1ml小份貯存于-20℃。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進行高壓處理。
【注意】DTT或含有DTT的溶液不能進行高壓處理。
產品訂購信息:
商品名稱 | CAS號 | 品牌 | 貨號 | 價格(元) |
DL-1,4-Dithiothreitol 1,4-二硫代蘇糖醇 |
3483-12-3 | Seebio | DCH0005I-1kg | 9777.00 |
DL-1,4-Dithiothreitol 1,4-二硫代蘇糖醇 |
3483-12-3 | Seebio | DCH0005I-100g | 1777.00 |
DL-1,4-Dithiothreitol 1,4-二硫代蘇糖醇 |
3483-12-3 | Seebio | DCH0005I-25g | 554.00 |
DL-1,4-Dithiothreitol 1,4-二硫代蘇糖醇 |
3483-12-3 | Seebio | DCH0005I-5g | 154.00 |
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