SARS-CoV-2 E484K 突變檢測試劑盒

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-01-16 10:31:00【大中小】

SARS-CoV-2 E484K 突變檢測試劑盒

SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit

◆試劑盒組成

20 Reactions
RT酶混合物（20×）	20 µL x 1支
一步反應混合物（2×）	200 μL x 1支
484E Wild Type Primer & Probe Mixture（probe：FAM） 484E野生型引物＆探針混合物（探針：FAM）	10 µL x 1支
E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture（probe：FAM） E484K突變型引物＆探針混合物（探針：FAM）	10 µL x 1支

200 Reactions
RT酶混合物（20×）	200 µL x 1支
一步反應混合物（2×）	1 mL x 2支
484E Wild Type Primer & Probe Mixture（probe：FAM） 484E野生型引物＆探針混合物（探針：FAM）	100 µL x 1支
E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture（probe：FAM） E484K突變型引物＆探針混合物（探針：FAM）	100 µL x 1支

◆背景

新冠病毒突變株在世界范圍內不斷擴散，感染人數也在不斷增多。

有報告指出，新冠病毒Beta（B.1.351）突變株和Gamma（P.1）突變株含有的E484K突變或會逃避免疫，使疫苗的效果降低^1-3）。

※ Beta（B.1.351）突變株：在南非首次發現的突變株

※ Gamma（P.1）突變株：在巴西首次發現的突變株

通過FUJIFILM Wako開發的Primer設計技術，可以高靈敏檢測難以被檢測的基因點突變。本產品是快速簡便檢測E484K突變的試劑盒。

◆特點

● 判定容易

通過比較使用突變株與野生株Primer/Probe Set時的Ct值來判定

● 一步法RT-qPCR快速檢測突變

約70 min即可完成

● 使用FUJIFILM Wako研發的Primer/Probe，高靈敏檢測突變

● 所有突變株均可在相同的反應條件下檢測

由于N501Y、E484K、L452R、E484Q的PCR反應條件均相同，可在同一個96孔板中進行檢測。

◆檢測原理

采用TaqMan^®探針的一步法RT-qPCR。

利用FUJIFILM Wako開發的Primer，高靈敏度檢測點突變。

▼使用前

病毒RNA量較多情況下，在突變株中使用常規株（非突變）檢測用“484E Wild type Primer & Probe Mixture”，也可以觀察到擴增信號。請務必使用常規株（非突變）檢測用的“484E Wild type Primer & Probe Mixture”和突變株檢測用的“E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture”兩種試劑進行檢測。

比較兩個Ct值，若突變株檢測用“E484K Mutant Type Primer & Probe Mixture”的Ct值小，則可判斷病毒為E484K突變株。

◆突變株的檢測應用數據

本試劑盒已經檢出以下3種新冠病毒（SARS-CoV-2）株。

● Gamma株（P.1）突變株（TY7-501、E484K突變、N501Y突變，由日本國立感染癥研究所提供）

● Beta株（B.1.351）突變株（TY8-612、E484K突變、N501Y突變，由日本國立感染癥研究所提供）

● Alpha株（B.1.1.7）突變株（QHN001、E484K無突變、N501Y突變，由日本國立感染癥研究所提供）

● VR-1986HK（E484K無突變、N501Y無突變、ATCC)

樣品拷貝份數：5000、500、50 copies/Well

循環數：45

① gamma（P.1）株：TY7-501（E484K突變、N501Y突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
Gamma株（含有E484K突變）

對于含有E484K突變的gamma株（P.1）突變株，使用突變株檢測用的“E484K Mutant type Primer & Probe”，可以確認到擴增信號。

常規株（非突變）檢測用的“484E Wild type Primer & Probe”，在5000 copies的條件下可以觀察到擴增信號，但可以在更低Ct值下檢測到突變株，由此判斷為E484K突變株。在500 copies和50 copies的條件下，未能檢測到常規株（非突變）的擴增信號。

② Beta株（B.1.351）：TY8-612（E484K突變、N501Y突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
Beta株（含有E494K突變）

對于含有E484K突變的beta株（B.1351）突變株，使用突變株檢測用的“E484K Mutant type Primer/Probe”，可以確認到擴增信號。

常規株（非突變）檢測用的“484E Wild type Primer/Probe”，在5000 copies的條件下可觀察到輕微的擴增信號，但可以在更低的Ct值下檢測到突變株，由此判斷為E484K突變株。在500 copies和50 copies的條件下，未能檢測到常規株（非突變）的擴增信號。

③ Alpha株（B.1.1.7）：QHN001（E484K無突變、N501Y突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
alpha株（含有E484K突變）

對于不含E484K突變的alpha株（B.1.1.7）突變株，利用常規株（非突變）檢測用的“484E Wild type Primer＆Probe”，可以確認到擴增信號。

突變株檢測用的“E484K Mutant type Primer＆Probe”，在5000copies的條件下可觀察到擴增信號，但可以在更低的Ct值下檢測到常規株（非突變），由此判斷為常規株的突變株。在500 copies和50 copies的條件下，未能檢測到突變株的擴增信號。

④ VR-1986HK（E484K無突變、N501Y無突變)

	5000 copies	500 copies	50 copies
無突變

對于不含N501Y突變和E484K突變的VR-1986HK，利用常規株（非突變）檢測用的“484E Wild type Primer＆Probe”，可以確認到擴增信號。

關于突變株檢測用的“E484K Mutant type Primer＆Probe”，在5000 copies的條件下可觀察到擴增信號，但可以在更低的Ct值下檢測到常規株（非突變），由此判斷為常規株的突變株。在500 copies和50 copies的條件下，未能檢測到突變株的擴增信號。

◆PCR反應條件

◆常規株以及突變株的基因型

產品列表

產品編號	產品名稱	產品規格
287-35603	SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 E484K突變檢測試劑盒	20 Reactions
281-35601	SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 E484K突變檢測試劑盒	200 Reactions