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酶免疫測(cè)定法(EIA)常用原輔料解析

來源:作者:人氣:-發(fā)表時(shí)間:2024-11-25 10:14:00【
酶免疫測(cè)定法(Enzyme Immunoassay,簡(jiǎn)稱EIA)‌是一種將酶的催化功能與抗原-抗體反應(yīng)相結(jié)合的免疫學(xué)測(cè)定技術(shù)。EIA常用的方法又包括酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、酶免疫組化法(IHC),前者測(cè)定可溶性抗原和抗體,后者測(cè)定組織中或細(xì)胞表面的抗原。該方法利用酶作為標(biāo)記物,最終形成酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的定性和定量分析。酶免分析免疫試劑具有檢測(cè)靈敏度高、特異性好、重復(fù)性高等優(yōu)點(diǎn)。酶免疫分析試劑在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境和食品檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。其應(yīng)用前景廣闊,特別是在臨床醫(yī)學(xué)診斷、食品安全性檢測(cè)以及環(huán)境。
酶免分析免疫試劑所需原料主要包括抗原、抗體、酶標(biāo)記劑、控制品、基質(zhì)和微孔板等。其中,抗原和抗體是酶免分析免疫試劑的核心原料,主要用于形成酶-抗體或酶-抗原復(fù)合物來檢測(cè)樣品中的分子。酶標(biāo)記劑是將特異性抗體與酶進(jìn)行反應(yīng)生成的復(fù)合物。常見的酶標(biāo)記劑有過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)等??刂破酚糜诖_定酶免分析免疫試劑測(cè)定的準(zhǔn)確性和可行性。基質(zhì)是顯色底物和停止底物的混合物。
酶免疫測(cè)定常用的標(biāo)記酶
堿性磷酸酶
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase ,AP)是一種膜結(jié)合糖蛋白。AP在自然界中廣泛分布,包括原核生物和更高的真核生物。其活性位點(diǎn)中包括兩個(gè)鋅離子和一個(gè)鎂離子,這三個(gè)位點(diǎn)的金屬離子對(duì)于酶活性至關(guān)重要。堿性磷酸酶可以水解各種單磷酸酯,并釋放無機(jī)磷酸鹽。1,2-二氧雜環(huán)丁烷化合物AMPPD作為一種超靈敏的堿性磷酸酶底物,在堿性磷酸酶的催化作用下,磷酸根基團(tuán)水解,形成一個(gè)不穩(wěn)定的中間體,自行分解后四元環(huán)斷裂釋放出大量能量,從而激發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。因此磁珠-抗體偶聯(lián)物與堿性磷酸酶-抗體偶聯(lián)物在化學(xué)發(fā)光試劑盒中可作為固相捕獲試劑和酶標(biāo)試劑用于檢測(cè)血清中的痕量抗原。與辣根過氧化物酶(HRP)相比,堿性磷酸酶具有穩(wěn)定性和高敏感性的優(yōu)勢(shì)。AP在生物學(xué)尤其是分子生物學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。
辣根過氧化物酶
辣根過氧化物酶,簡(jiǎn)稱HRP,HRP是一種單鏈多肽,含有4個(gè)二硫橋。它是一種糖蛋白,含有18%的碳水化合物。該碳水化合物組成包括半乳糖,阿拉伯糖,木糖,巖藻糖,甘露糖,甘露糖胺,半乳糖胺,這取決于特定的同功酶。 它的分子量(44 kDa)包括分子量(33,890道爾頓)的多肽鏈,血紅素加Ca2 +(700道爾頓),碳水化合物(約9,400道爾頓)。有7種HRP的同工酶存在。辣根過氧化物酶的等電點(diǎn)范圍從3.0 - 9.0。辣根過氧化物酶是目前使用廣泛的一種標(biāo)記酶,用來標(biāo)記抗體或其它蛋白質(zhì),既能用于定位檢測(cè),也能用于定量測(cè)定。 辣根過氧化物酶(HRP)的從辣根根(Amoracia RUSTICANA)中分離。它是用于生物化學(xué)中的應(yīng)用,如western印跡,ELISA和免疫組化。辣根過氧化物酶是用來放大弱信號(hào),增加被探測(cè)的目標(biāo)分子,如蛋白質(zhì)。它通常被用于確定葡萄糖和溶液中的過氧化物的量。它也被用于在煙曲霉快速藥敏測(cè)定。
西寶生物提供酶免測(cè)定相關(guān)原輔料,列表持續(xù)更新中
緩沖液
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
ACC0030B
Tris Base
三羥甲基氨基甲烷
77-86-1
500g,25Kg
ACC0029A
Tris HCl
三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽
1185-53-1
500g,25Kg
ACC0013A
HEPES (Free Acid)
N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸
7365-45-9
1Kg
ACC0016A
MES H2O
2-(N-嗎啉代)乙烷磺酸一水
145224-94-8
1Kg
表面活性劑
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
ACH0057A
Pluorinic F68
聚醚F68
9003/11/6
100g
ACH0026A
TRITON X-100
曲拉通X-100
9002-93-1
1L,5L
ACH0027A
TWEEN 20
吐溫20
9005-64-5
1L,5L
ACH0028A
TWEEN 80
吐溫80
9005-65-6
1L,5L
ACH0003B
BRIJ 35
布里杰-35
9002-92-0
500g
ACH0047A
 EMULGEN B-66
 EMULGEN B-66
N/A
 500g
AME0001A
 Emulgen A-60
 Emulgen A-60
N/A
 500g
ACH0097A
 EMULGEN A-90
 EMULGEN A-90
N/A
 500g
底物
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
DCE0005A
TMB.2HCl
3,3'5,5'-四甲基聯(lián)苯胺鹽酸鹽
64285-73-0
25g
DCD0004A
NBT
氯化硝基四氮唑NBT
298-83-9
5g
DJL1279A
NBT/BCIP solution
BCIP/NBT 堿性磷酸酶底物液
N/A
1L
DCD0003A
pNPP-2Na
4-硝基苯基磷酸二鈉鹽,六水
333338-18-4
1g
DCE0059B
ONPG
鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷
369-07-3
1g
ECE0083A
X-Gal
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
7240-90-6
1g
標(biāo)記物
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
ECE0066M
Peroxidase(HRP)
辣根過氧化物酶
9003-99-0
100mg,1g
DCE0108L
Alkaline Phosphatase recombinant(Highly Active)
Seebio® 重組堿性磷酸酶(高活性)
9001-78-9
5mg,25mg,100mg
EBY0680A
Biotin NHS
N-羥基琥珀酰亞胺生物素
35013-72-0
100mg,1g
ECL0006W
Streptavidin
鏈霉親和素
9013-20-1
10mg,100mg
016-030-084
Peroxidase-Streptavidin
鏈霉親和素,HRP標(biāo)記
N/A
1mg
二抗
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
DCY4501A
Monoclonal Mouse Anti-Human IgG antibody
鼠抗人IgG單抗
 
1mg
DCY4502A
Monoclonal Mouse Anti-Human IgM antibody
鼠抗人IgM單抗
 
1mg
DCY4483B
Goat Anti Mouse IgG antibody
羊抗鼠IgG抗體
 
1mg
保護(hù)劑
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
DCL0001B
BSA
牛血清白蛋白
9048-46-8
500g
防腐劑
貨號(hào)
英文品名
中文品名
cas No
包裝
ACN0037B
Krovin 300
防腐劑KV300
N/A
500ml,5L
ACN0046A
Krovin 500
防腐劑KV600
N/A
500ml,5L

 

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