化學(xué)名稱: Polysucrose (3’,6’dihydroxy3-oxospiro (isobenzofuran1(3H) ,9’[9H] xanthen]-5(or 6)-yl) carbamothioate
Fluorescein isothiocyanate Fluoresceinyl thiocarbamoyl Polysucrose

聚蔗糖是一種具有良好生物相容性的聚合物,比葡聚糖對酸更敏感，因此在酸性條件下須小心操作。TdB生產(chǎn)FITC標(biāo)記聚蔗糖，從20kDa到400kDa，檢查所有批次的分子量、取代度、干燥失重和游離FITC以保證質(zhì)量。FITC標(biāo)記聚蔗糖為黃色粉末。

聚蔗糖是由蔗糖與環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)合成的聚合物。FITC標(biāo)記聚蔗糖，在與合成FITC標(biāo)記葡聚糖相似的條件下，讓聚蔗糖與FITC反應(yīng)制備而成。聚蔗糖具有更大的球形結(jié)構(gòu)，與葡聚糖相比彈性較小

FITC標(biāo)記聚蔗糖是黃色粉末，極易溶于水和鹽溶液，形成黃色的溶液。本品也可以溶于DMSO ,甲酰胺和一些極性有機(jī)溶劑中，但在低鏈脂肪醇、丙酮、氯仿，二甲基甲酰胺中溶解度較低。聚蔗糖是由蔗糖和環(huán)氧氯丙烷聚合而成。該聚合物高度分叉，在溶液中性能接近球形分子（參見物理化學(xué)性質(zhì)章節(jié)）。聚蔗糖僅包含伯羥基和仲羥基基團(tuán)。

圖1 FITC標(biāo)記聚蔗糖分子結(jié)構(gòu)示意圖

FITC標(biāo)記聚蔗糖在pH 9下的最大激發(fā)波長是493nm，最大發(fā)射波長為523nm。FITC標(biāo)記聚蔗糖溶液在pH 3-9范圍內(nèi)的熒光與pH相關(guān)。 在生物介質(zhì)中的測量可能會顯著地影響熒光強(qiáng)度，熒光強(qiáng)度因此得到增強(qiáng)或削弱。

按照de Belder和Granath所述（1）類似方法，通過熒光素標(biāo)記聚蔗糖片段。熒光素部分通過穩(wěn)定的硫代氨甲酰鍵連接，并且標(biāo)記過程不會致聚蔗糖解聚。FITC標(biāo)記聚蔗糖中，每單位葡萄糖含有0.001-0.008 摩爾 FITC。低取代度下，電荷的影響很小，這也符合滲透性研究的基本要求。

據(jù)結(jié)構(gòu)推測，聚蔗糖分子在溶液中表現(xiàn)類似球狀分子。 表1 (下方)葡聚糖和聚蔗糖組分的Stokes半徑的比較，反映出其分子彈性的差異。該分子被認(rèn)為是介于堅固的球體和彈性的線圈之間的中間形態(tài)。因此，當(dāng)比較具有哦相近分子量的聚蔗糖和葡聚糖時，聚蔗糖的分子尺寸常常更小一些。在使用GPC檢測聚蔗糖產(chǎn)品的分子量時，使用葡聚糖參照品是不合適的。相較于同等濃度的蔗糖溶液，聚蔗糖溶液有非常低的滲透壓。 10%的聚蔗糖70溶液的滲透壓為3 mOs/kg，而同樣10%的蔗糖溶液滲透壓為 150 mOs/kg。

MW *103	葡聚糖Stokes半徑	聚蔗糖Stokes半徑	白蛋白Stokes半徑
500	147	106	-
70	58	49.5	35
49	44.5	40	-

FITC標(biāo)記聚蔗糖粉末在密閉容器中儲存在室溫下，在溶液中至少可以穩(wěn)定6年。雖然FITC標(biāo)記聚蔗糖的穩(wěn)定性尚未詳細(xì)研究，熒光素和聚蔗糖之間的硫代氨甲酰鍵的穩(wěn)定性類似于葡聚糖（關(guān)于FITC葡聚糖的穩(wěn)定性信息，請參見相關(guān)數(shù)據(jù)文件）。只有在較高的pH（>9）和溫度下，硫氨酰鍵才有水解的風(fēng)險。

FITC葡聚糖在pH4溫度35℃時可穩(wěn)定1個月，但由于蔗糖糖苷鍵的不穩(wěn)定性，不推薦用于聚蔗糖基產(chǎn)品的保存。聚蔗糖本身可以在中性和微堿性的pH下加壓解聚。

聚蔗糖組分經(jīng)口或靜脈測試無中毒癥狀。在實(shí)驗(yàn)動物靜脈注射聚蔗糖（分子量100000到500000），劑量高達(dá)12g/kg時，亦未出現(xiàn)中毒癥狀。不過，聚蔗糖不會在血液中降解，并在肝臟、脾臟和腎臟中堆積。聚蔗糖與細(xì)胞、病毒或微生物具有良好的生物相容性，在分離技術(shù)中已應(yīng)用數(shù)十年。

FITC標(biāo)記聚蔗糖主要用于研究滲透性和微循環(huán)。由于其球形結(jié)構(gòu)，常被用于腎小球過濾研究。

生物學(xué)方面及其應(yīng)用

聚蔗糖及其衍生物，為研究多種器官的生理學(xué)研究提供了多種有趣的特性。近年來許多關(guān)于腎小球膜的文章面世。與葡聚糖不同的是，聚蔗糖具有更致密的球狀結(jié)構(gòu)，似乎具有一定的韌性，可視其為介于硬球狀蛋白和松散的葡聚糖彈性線圈之間的中間結(jié)構(gòu)。聚蔗糖具有良好的生物相容性，不為腎小管分泌或再吸收。

研究了葡聚糖和聚蔗糖窄分布樣品在膜中擴(kuò)散系數(shù)（2）。結(jié)果表明，聚蔗糖的擴(kuò)散性能與線性聚合物有顯著差異，線性聚合物在膜中擴(kuò)散速度較快。作者的結(jié)論是，聚蔗糖的表現(xiàn)更類似一個固體球。使用GPC結(jié)合光散射和粘度檢測器對聚蔗糖分子的尺寸和構(gòu)象進(jìn)行了仔細(xì)的研究，結(jié)果表明聚蔗糖分子被理解為介于固體球和溶解性良好的線性不規(guī)則線圈之間的中間結(jié)構(gòu)（3）。Venturoli和Rippe（4）回顧了聚蔗糖和葡聚糖在腎小球滲透選擇性的數(shù)據(jù)，并與腎小球蛋白進(jìn)行了對照。作者闡述了影響結(jié)果的各種性質(zhì)，如分子大小、形狀、電荷和柔韌性，并用不同的孔隙模型對其結(jié)果進(jìn)行了評價。

FITC標(biāo)記聚蔗糖主要用于研究滲透性和細(xì)胞、血管和組織中的傳輸。附加的好處是測量熒光度，可提供健康和病變組織傳輸和滲透性的定量數(shù)據(jù)。這些研究可通過活體熒光顯微鏡實(shí)時進(jìn)行。該技術(shù)具有高靈敏度，在組織液中可檢測到低至1微克/毫升的濃度。

通用程序

倉鼠頰囊微血管研究，已證明是一個有用的模型，用于研究不同實(shí)驗(yàn)條件下的血漿滲漏，例如缺血/再灌注后，一系列炎癥介質(zhì)、寄生蟲和細(xì)菌的局部應(yīng)用。利用該技術(shù)可以實(shí)時研究血管滲透性的變化，與白細(xì)胞粘附和活化等微血管事件相關(guān)。使用合適的濾光片（490/520nm）對頰囊進(jìn)行活體熒光顯微鏡檢查，并用數(shù)碼相機(jī)拍攝圖像。實(shí)驗(yàn)動物推注FITC標(biāo)記聚蔗糖的適宜濃度為5%（約100mg/kg體重）（5-7）。本文介紹了一種使用兔耳腔的替代方案。用可再生的鈦耳腔（兔）為材料，用熒光標(biāo)記葡聚糖研究血液/淋巴系統(tǒng)的微循環(huán)。植入4-8周后可見淋巴生長（8）。

多分散性

多糖是測量腎小球滲透選擇性的優(yōu)良探針，結(jié)果可復(fù)制，可靠和簡明。作者詳細(xì)闡述了 影響分子大小、形狀、電荷和柔韌性等結(jié)果，并在各種孔隙模型中評估其結(jié)果。

靜脈注射聚蔗糖，腎小球通透性的研究表明，在50Å 左右有一個極限值，而葡聚糖極限值則在60-70°之間，這是由于葡聚糖具有更大的靈活性。為了闡明大分子的傳輸途徑，我們研究了FITC在缺失內(nèi)皮細(xì)胞的裸小鼠體內(nèi)的代謝情況。使用FITC標(biāo)記聚蔗糖70和400（即FITC標(biāo)記菊粉）在不同滲透率下研究腎小球滲透性。（15）

對葡聚糖和聚蔗糖的腎小球滲透性研究表明，腎小球膜對聚蔗糖的屏障比對葡聚糖的屏障更為嚴(yán)格（16）。

有趣的是，聚蔗糖的篩分系數(shù)θ值與不帶電的球狀蛋白的報導(dǎo)值接近。應(yīng)用FITC-70/400（17）監(jiān)測大鼠手術(shù)后腎小球篩分和肌肉損傷。采用FITC標(biāo)記聚蔗糖400（960微克）、FITC標(biāo)記聚蔗糖70（40微克）和FITC inulin（500微克）的混合物搓成小團(tuán)喂食大鼠。采用FITC標(biāo)記聚蔗糖70/400檢測caveolin-1基因敲除小鼠腎小球的篩分，探討影響腎小球滲透性的因素（18）。

FITC標(biāo)記聚蔗糖70和白蛋白用于在使用酶降解糖萼中各種多聚糖胺治療前后，評估小鼠的清除率（19）。給大鼠注入FITC標(biāo)記聚蔗糖70和白蛋白，探討溫度和氯化銨濃度對大鼠清除率的影響。溫度在8～37℃范圍時，篩分系數(shù)差異并不顯著。聚蔗糖的作用與葡聚糖不同，θ在20-70Å范圍內(nèi)低于相應(yīng)的葡聚糖。溶質(zhì)形狀的影響可能超過顆粒尺寸和電荷（20，21）。

為進(jìn)一步解釋蛋白質(zhì)穿過毛細(xì)血管壁的傳導(dǎo)，使用包括FITC標(biāo)記聚蔗糖（22）在內(nèi)的多種滲透性探針，以內(nèi)皮細(xì)胞質(zhì)膜微囊缺乏小鼠為對象進(jìn)行了研究。測定灌注低離子強(qiáng)度的FITC標(biāo)記聚蔗糖的孤立腎的清除率（23）。含約70mg /L的FITC標(biāo)記聚蔗糖70灌流液用來評估灌注9周后糖尿病患天然白蛋白清除率的增加，是由于電荷選擇性降低還是由于大孔比例的改變引起的（24）。

近期的研究探索了一氧化氮（25）、活性氧（26）和清除劑對腎小球通透性的影響（27）。

產(chǎn)品編號	品名	分子量(kDa)	包裝
FP20-100mg	FITC-Polysucrose 20	20	100 mg
FP20-1g			1 g
FP40-100mg	FITC-Polysucrose 20	40	100 mg
FP40-1g			1 g
FP50-100mg	FITC-Polysucrose 50	50	100 mg
FP50-1g			1 g
FP70-100mg	FITC-Polysucrose 70	70	100 mg
FP70-1g			1 g
FP100-100mg	FITC-Polysucrose 100	100	100 mg
FP100-1g			1 g
FP170-100mg	FITC-Polysucrose 170	170	100 mg
FP170-1g			1 g
FP400-100mg	FITC-Polysucrose 400	400	100 mg
FP400-1g			1 g

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