去端肽膠原，蜂窩海綿(Atelocollagen Honeycomb) - 3D培養和3D支架組織工程研究的有用工具

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-11-08 09:31:00【大中小】

去端肽膠原，蜂窩海綿

Atelocollagen Honeycomb

3D培養和3D支架組織工程研究的有用工具

◆背景

“蜂窩”膠原海綿具有方向統一、均勻的孔（200-400 μm），細胞可以穿透并在其中增殖密集地排列。這種結構有利于營養物質到海綿內為細胞做準備供應，并釋放代謝廢物和生化產物。細胞能夠增殖且填充管腔，形成均勻的細胞團。

去端肽膠原蜂窩海綿 Atelocollagen Honeycomb Sponge (KOU-CSH-10) 為2 mm的立方體，應用于3D細胞培養物和高密度細胞培養基組織工程細胞支架	去端肽膠原蜂窩海綿 Honeycomb Disk 96 （KOU-CSH-96）直徑為6 mm圓盤形，適用于96孔和高通量篩選細胞培養。
KOU-CSH-10 : stereoscopic microscope image 立體顯微鏡圖像	KOU-CSH-96 : stereoscopic microscope image 立體顯微鏡圖像
Electron microscope image of Honeycomb sponge 蜂窩海綿的電子顯微圖像	Electron microscope image of mouse fibroblast cell culture in 'Honeycomb collagen sponge 蜂窩膠原海綿小鼠成纖維細胞培養的電子顯微鏡圖像

◆去端肽膠原的特點

去端肽膠原是由蛋白酶溶解的膠原，但是它的物理性質幾乎與天然未加溶的膠原蛋白相同。而去端肽膠原更具有優越的特性。

◆特點與優點

“蜂窩”膠原海綿由高度純化I型去端肽膠原制備（牛皮來源），并且可以通過膠原酶降解。

◆應用

3D培養

組織工程3D支架研究

◆使用實例

實例 1

NG1RGB人成纖維細胞在蜂窩圓盤（KOU-CSH-96）

	飼養層細胞/孔（×10³）	附著細胞于蜂窩圓盤96（×10³）
	10	2.2
	20	5.3
	40	8.6
細胞增殖：如圖所示，在蜂窩圓盤96培養孔中接種。細胞增殖通過NADH依賴性燃料（WST-8）測定OD值。	細胞附著：圓盤培養如圖所示，培養一天后轉移至新培養孔，并測定細胞數，顯示20%的細胞附著。

實例 2

胚體在蜂窩海綿支架體內移植后的胚體致畸移植

小鼠腎臟在海綿蜂窩支架移植（EB/+CSH）胚體移植后12周后，沒有形成畸胎瘤的跡象，而無KOU-CSH-10（ES/-CSH）的所有小鼠胚體培養產生畸胎瘤。組織學上，移植ES/+CSH與相鄰的主腎組織沒有明顯區別，表明沒有具體的誘導自發分化難以區分。

方法：板中培養小鼠胚胎干（ES）細胞進行胰蛋白酶處理，通過尼龍網過濾，接種到96孔板（1×10⁴細胞/孔），培養5天，形成胚狀體（EB）。當EB與蜂窩海綿（KOU-CSH-10）混合，EB迅速、均勻融入KOU-CSH-10的矩陣中。EB/+CSH復合物移植到6周齡小鼠的腎筋膜。

實例 3

體內小鼠胚胎干/間質細胞鑲嵌球移植KOU-CSH-10支架后新生毛發。

方法：小鼠ES細胞和小鼠胚胎間充質細胞（MDU1）共培養以產生兩種細胞的鑲嵌球體。鑲嵌球體與KOU-CSH-10去端肽膠原蜂窩海綿混合，在6周齡小鼠的背部肌肉移植。

<參考文獻>
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.

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