KANEKA KanCapA(TM) 抗體純化樹脂

來源：作者：人氣：-發表時間：2024-02-19 09:35:00【大中小】

新標準　抗體純化樹脂

KANEKA KanCapA™

本產品為 Protein A 親和層析樹脂。用于從活體樣本及細胞培養上清純化免疫球蛋白及包含 Fc 段的重組抗體。

本產品由高交聯纖維素微珠及新研發的耐堿 Protein A 配體構成，可用于 IgG 的親和純化。

◆特點

•　耐堿

•　良好洗脫條件

•　高抗體結合能力

•　可循環使用

•　便于擴增

◆關于改良 Protein A

KanCapA™ 采用的不是天然 Protein A，而是使用變異型Ｃ域５聚物的新型 Protein A。

天然 Protein A的Ｃ域結合于 Fc 段，也結合于 Fab 段，其中與VH3亞家族抗體的反應性較高。該類型的解離需要弱酸條件下洗脫。

為改善該問題，使用分子設計系統重新設計分子，研發了保持耐堿性、改善 Fab 段的非特異性結合及洗脫曲線的 Protein A。

本產品采用的 Protein A

◆產品特性

KANEKA KanCapA™　產品特性

矩陣	高交聯纖維	※ 　　1)　平均粒度為累積體積分布的中間粒度　　2)　５%動態結合容量為前端分析測定（停留時間３分鐘）　　3)　可在強堿條件下清洗，但請避免長時間的清洗　　4)　請勿冷凍
平均粒度¹⁾	65-85 μm
配體	Protein A，重組(抗強堿)
結合	化學結合（還原胺化）
動態結合容量²⁾	≧35 mg 人多克隆 IgG／mL載體
化學穩定性³⁾	使用親和層析通用可溶性溶媒時較穩定
pH 范圍³⁾	pH 2-13
靜止清洗條件³⁾	0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉 6-8 mol/L尿素、6 mol/L鹽酸胍
流量	最大 500cm/h（層高：20-25 cm）
停留時間	≧３分鐘（建議：４-６分鐘）
保存條件⁴⁾	20%乙醇渾濁液，１～10℃

◆應用

1、Fab段　純化應用

•　利用 KANEKA KanCapA™ 的特點，可從經木瓜蛋白酶處理后的 IgG 溶液分餾 Fc 段及 Fab 段。

2、IgG 洗脫曲線（pH3.5 & pH3.0）

•　洗脫范圍已優化，可清晰地分餾提純。

3、通過強堿清洗進行樹脂循環

•　進行 300 次循環處理后（0.1M 氫氧化鈉溶液 15 分鐘），IgG 的結合容量的減少率仍低于20%，表明其循環性能較高。

使用 0.1 M 氫氧化鈉溶液進行循環處理后的 IgG 結合活性曲線數據

循環處理后（0.1 M 氫氧化鈉溶液 15 分鐘）的IgG回收率及 Protein A 配體的滲濾量的曲線數據

4、動態結合容量　曲線數據

•　在4-6分鐘停留時間過程中，DBC 較高。

※　動態結合容量表示純化樣本在流動的狀態下，回收程度的數值。動態結合容量較高的載體的流速較快，可回收大量目標分子，因此可以認為在短時間內有效純化目標分子的優質載體。

KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動態結合容量)　曲線數據

5、不同大小的樹脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數據

填充依賴壓力的計算方法是從整體壓力減去系統壓力。

6、KANEKA KanCapA™　于各種大小的柱的填充效果

•　KANEKA KanCapA™ 適用于各種大小的柱。

以下是脈沖注入數據：

可溶性溶媒：1(v/v)% 丙酮

注入量：1% 柱容量

流速：60 cm/h