SARS-CoV-2 N501Y 突變檢測試劑盒

來源：作者：人氣：-發表時間：2025-01-17 11:01:00【大中小】

SARS-CoV-2 N501Y 突變檢測試劑盒

SARS-CoV-2 N501Y Mutation Detection Kit

◆試劑盒組成

供20次反應用
RT酶混合物（20×） RT 酶混合物（20×）	20 µL x 1支
One-Step Reaction Mix (2×) 一步反應混合物（2×）	200 μL x 1支
501N Wild type Primer/Probe (Probe:FAM) 501N 野生型引物＆探針混合物（探針：FAM）	10 µL x 1支
N501Y Mutant Type Primer/Probe (Probe:FAM) N501Y 突變型引物＆探針混合物（探針：FAM）	10 µL x 1支

供200次反應用
RT Enzyme Mix (20×) RT酶混合物（20×）	200 µL x 1支
One-Step Reaction Mix (2×) 一步反應混合物（2×）	1 mL x 2支
501N Wild type Primer/Probe (Probe:FAM) 501N 野生型引物＆探針混合物（探針：FAM）	100 µL x 1支
N501Y Mutant Type Primer/Probe (Probe:FAM) N501Y 突變型引物＆探針混合物（探針：FAM）	100 µL x 1支

◆背景

新冠病毒突變株在世界范圍內不斷擴散，感染人數也在不斷增多。如Alpha (B.1.1.7)、Beta (B.1.351) 和 Gamma (P.1) 突變株都有著N501位點的突變，與常規毒株相比，具有更強的感染性。

※ Alpha (B.1.1.7)：英國最先檢測出的突變株

※ Beta (B.1.351)：南非最先檢測出的突變株

※ Gamma (P.1)：巴西最先檢測出的突變株

通過FUJIFILM Wako研發的Primer技術，可以高靈敏度檢測難以檢測的基因點突變。本試劑盒可以快速、簡便地檢測N501Y突變。

◆特點

● 判定容易

使用突變株與常規株（無突變）的Primer/Probe （引物/探針）套裝，通過比較Ct值進行判定

● 一步法RT-qPCR快速檢測突變

約70 min即可完成

● 使用FUJIFILM Wako研發的Primer/Probe（引物/探針）套裝，高靈敏度檢測突變

● 所有突變株可在相同反應條件下進行檢測

由于N501Y、E484K、L452R、E484Q的PCR反應條件相同，因此可在同一塊96孔板中進行檢測。

◆檢測原理

采用TaqMan^®探針的One Step RT-qPCR法進行檢測。

利用FUJIFILM Wako開發的Primer引物技術，高靈敏度檢測點突變。

▼使用前

病毒RNA量較多時，在突變株中使用常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Primer/Probe”，也可以觀察到擴增信號。

務必使用常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Primer/Probe”和突變株檢測用的“N501Y Mutant Type Primer/Probe”兩種試劑進行檢測。

比較兩種試劑的Ct值，若突變株檢測用“N501Y Mutant Type Primer/Probe”的Ct值小，則可判斷病毒為N501Y突變株。

◆突變株的檢測應用數據

本試劑盒已檢測出以下4種新冠病毒（SARS-CoV-2）株。

● Alpha (B.1.1.7)突變株（QHN001、N501Y突變，由國立感染癥研究所提供）

● Beta (B.1.351)突變株（TY8-612、N501Y突變、E484K突變，由國立感染癥研究所提供）

● Gamma (P.1)突變株（TY7-501、N501Y突變、E484K突變，由國立感染癥研究所提供）

● VR-1986HK（N501Y無突變、E484K無突變 ATCC)

拷貝數：5000、500、50copies/Well 3種

循環數：45

① Alpha (B.1.1.7)突變株：QHN001（N501Y突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
Alpha型（含N501Y突變）

對于含有N501Y突變的alpha (B.1.1.7)突變株，利用突變株檢測用“N501Y Mutant type Primer/Probe”，可以確認到擴增信號。另外，在常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Prime＆Probe”中未觀察到擴增，由此判斷為N501Y突變株。。

② Beta株（B.1.351）：TY8-612（E484K突變、N501Y突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
Beta型：TY8-612 （N501Y 突變，E484K 突變）

常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Prime/Probe”，在5,000 copies的條件下可觀察到輕微的擴增信號，但突變株的可以在更低Ct值下檢測到，由此判斷為N501Y突變株。在復制500 copies和50 copies的條件下，未檢測到常規株（非突變）的擴增信號。

③ Gamma (P.1)突變株：TY7-501（N501Y突變、E484K突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
Gamma型（N501Y 突變，E484K 突變）

對于含有N501Y突變的巴西株突變株，利用突變株檢測用的“N501Y Mutant type Primer/Probe”，可以確認到擴增信號。

常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Prime＆Probe”，在復制5,000 copies的條件下可觀察到擴增信號，但突變株的可以在更低Ct值下檢測到，由此判斷為N501Y突變株。在500 copies和500copies的條件下，未能檢測到常規株（非突變）的擴增信號。

④ VR-1986HK（N501Y無突變、E484K無突變）

	5000 copies	500 copies	50 copies
無突變

對于不含N501Y突變和E484K突變的VR-1986HK，利用常規株（非突變）檢測用的“501N Wild type Primer/Probe”，可以確認到擴增信號。

在突變株檢測用的“N501Y Mutant type Prime/Probe”中未觀察到擴增，由此判斷為常規株的突變株。

◆PCR反應條件

◆常規株以及突變株的基因型

◆產品列表

產品編號	產品名稱	產品規格
283-35703	SARS-CoV-2 N501Y Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 N501Y 突變檢測試劑盒	20次反應用
287-35701		供200次反應用

◆相關產品

產品編號	產品名稱	產品規格
281-35601	SARS-CoV-2 E484K Mutation Detection Kit SARS-CoV-2 E484K突變檢測試劑盒	供200次反應用
287-35701	SARS-CoV-2 RT-qPCR Detection Kit Ver.2 SARS-CoV-2 RT-qPCR檢測試劑盒Ver.2	供200次反應用
287-35701	SARS-CoV-2 Lysis buffer Ver.2 SARS-CoV-2 裂解緩沖液 Ver.2	供200次反應用