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PROTEOSTAT(R)熱位移穩(wěn)定性分析試劑盒 - 加速蛋白穩(wěn)定性篩選

來源:作者:人氣:-發(fā)表時間:2023-12-25 09:42:00【
PROTEOSTAT® 熱位移穩(wěn)定性分析試劑盒
加速蛋白穩(wěn)定性篩選
● 簡單、靈敏、均相的熒光檢測,無需分離或稀釋樣品
● 可用于加速優(yōu)化蛋白穩(wěn)定性條件
● 無需了解蛋白功能或配體結合位點,也可進行配體結合檢測
● 可在較廣的溫度、pH值和離子強度范圍內(nèi)使用,與常用的緩沖液和輔料兼容
● 為采用多種儀器進行交叉驗證提供一種方便、互補的正交方法
PROTEOSTAT® 熱位移穩(wěn)定性檢測試劑盒內(nèi)含有一種檢測蛋白聚集的熒光染料,因此可用于監(jiān)測系統(tǒng)熱應力條件下的蛋白穩(wěn)定性。通過熱位移分析,可輕松確定大部分蛋白的聚集溫度。聚集溫度是蛋白穩(wěn)定性的指標,可用于優(yōu)化使蛋白聚集較小化的條件,以及鑒定與目標蛋白結合并賦予結構穩(wěn)定性的配體。配合使用相關的 PROTEOSTAT® 蛋白復性和聚集敏感試劑盒(產(chǎn)品編號:ENZ-51040)可確定合適的蛋白復性條件。增加聚集溫度的優(yōu)化條件可使蛋白的穩(wěn)定性有所提升。
圖1. 利用PROTEOSTAT® Thermal shift 穩(wěn)定性檢測試劑盒分析山羊抗小鼠 IgG(pH=7.4,11.2 mg/mL)的典型結果。使用 RT-PCR 儀器,以 3°C/min 的速率將溫度從30°C升至99°C,同時連續(xù)讀取熒光值。藍線表示原始熒光強度數(shù)據(jù),紅線表示對應的一階導數(shù)曲線,代表熒光強度曲線的斜率。通過一階導數(shù)圖,可得出蛋白的聚集溫度(Tagg:斜率最大點)。
PROTEOSTAT® 染料的 Tagg 值不同于 SYPRO® Orange 染料的 Tm 值
圖2. PROTEOSTAT® 染料所得得聚集溫度不同于使用 SYPRO® Orange 染料獲得的熔解溫度。圖2. SYPRO® Orange 染料是一種環(huán)境敏感染料,能夠與未折疊蛋白的疏水區(qū)結合,用于測量 Tm。T是 Thermal shift 曲線的溫度中點,在溫度中點 T時,樣品中的目標蛋白一半呈現(xiàn)出解折疊狀態(tài),而另一半保持折疊狀態(tài)。解折疊不依賴于相鄰蛋白。PROTEOSTAT 是一種分子轉子染料,可與蛋白質聚集體的表面結合。Tagg 是熱聚集曲線的中點。蛋白解折疊后開始聚集,聚集取決于相鄰蛋白。蛋白濃度越高,聚集的趨勢越大。
◆產(chǎn)品詳情
特點
本試劑盒用于監(jiān)測系統(tǒng)熱應力條件下的蛋白穩(wěn)定性。
品質保證
每批次 PROTEOSTAT®Thermal shift 穩(wěn)定性檢測試劑盒的樣品試劑盒均已按照操作手冊中的步驟進行測試。
16 μg/ml β-乳球蛋白的聚集溫度單峰位于76°±2°C處。
使用/穩(wěn)定性
在產(chǎn)品標簽注明的日期前,試劑盒組分在適當?shù)膬Υ鏃l件下可穩(wěn)定保存。
 
可存放于-20°C的無霜冰箱中。
儲存條件
避光。避免反復凍融。
運輸方式
干冰運輸
儲存溫度
-20°C
組分
· PROTEOSTAT® TS 檢測試劑
· β-乳球蛋白對照
· 10X 檢測緩沖液
技術信息/產(chǎn)品說明
應用說明:
Prediction of Aggregation Propensity   and Monitoring of Aggregation of Antibody-Drug Conjugates (ADC) using   ProteoStat® Reagents
檢測樣本:
PROTEOSTAT® Cited Samples
Enzo及PROTEOSTAT均為Enzo Life Sciences, Inc. 的商標。Grenier為Grenier Bio-One 的注冊商標。Enzo的部分產(chǎn)品和產(chǎn)品應用受美國、外國專利以及正在申請的專利的保護。本產(chǎn)品由ENZO LIFE SCIENCES, INC. 制造和銷售,僅供研究市場的終端用戶作研究使用,不得用于診斷或治療用途。購買行為不包括在商業(yè)上使用、開發(fā)或以其他方式利用本產(chǎn)品的任何權利或許可。未經(jīng)ENZO LIFE SCIENCES, INC. 事先明確書面授權,嚴禁對本產(chǎn)品進行任何商業(yè)用途、開發(fā)或利用,或使用本產(chǎn)品進行研發(fā)。
監(jiān)管狀態(tài)
RUO - 僅供研究使用
◆參考文獻
  1. Constructive approach for synthesis of a functional IgG using a reconstituted cell-free protein synthesis system: S. Murakami, et al.; Sci. Rep. 9, 671 (2019), Application(s): Purified IgG or Trastuzumab,
  2. Structural insights into humanization of anti-tissue factor antibody 10H10: A. Teplyakov, et al.; MAbs. 10, 269 (2018), Application(s): Monoclonal antibodies,
  3. Protein catalyzed capture agents with tailored performance for in vitro and in vivo applications: M.B. Coppock, et al.; Biopolymers 108, e22934 (2017), Application(s): Stability of peptide-based ligands,
  4. Time-Dependent Protein Thermostability Assay: I. Vandecaetsbeek, et al.; Methods Mol. Biol. 1377, 79 (2016),
  5. Effect of Polyethylene Glycol Conjugation on Conformational and Colloidal Stability of a Monoclonal Antibody Antigen-Binding Fragment (Fab'): C. Roque, et al.; Mol. Pharm. 12, 562 (2015),
  6. Modulating the thermostability of Endoglucanase I from Trichoderma reesei using computational approaches: G. Bayram Akcapinar, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 28, 127 (2015),
  7. Site-specific conjugation of monomethyl auristatin E to anti-CD30 antibodies improves their pharmacokinetics and therapeutic index in rodent models: F. Lhospice, et al.; Mol. Pharm. 12, 1863 (2015),
  8. A general approach to antibody thermostabilization: A.D. McConnell, et al.; MAbs 6, 1274 (2014), Application(s): Stability of antibodies,
  9. Modifications of cysteine residues in the transmembrane and cytoplasmic domains of a recombinant hemagglutinin protein prevents cross-linked multimer formation and potency loss: K.M. Holtz, et al.; BMC Biotechnol. 14, 111 (2014),
  10. An integrated approach to extreme thermostabilization and affinity maturation of an antibody: A.D. McConnell, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 26, 151 (2013),
  11. Mouse, but not human STING, binds and signals in response to the vascular disrupting agent 5,6-dimethylxanthenone-4-acetic acid: J. Conlon, et al.; J. Immunol. 190, 5216 (2013),
  12. Optimization of protein purification and characterization using Thermofluor screens: S. Boivin, et al.; Protein Expr. Purif. 91, 192 (2013), (Review),
  13. Protein quality control acts on folding intermediates to shape the effects of mutations on organismal fitness: S. Bershtein, et al.; Mol. Cell 49, 133 (2013), Application(s): Aggregation propensity of the DHFR proteins,
  14. Estimation of protein aggregation propensity with a melting point apparatus: A.A. Raibekas; Anal. Biochem. 380, 331 (2008),
  15. Thermofluor-based high-throughput stability optimization of proteins for structural studies: U.B. Ericsson, et al.; Anal. Biochem. 357, 289 (2006),
  16. Structure of the cross-beta spine of amyloid-like fibrils: R. Nelson, et al.; Nature 435, 773 (2005),
  17. Study of the thermal denaturation of ribonuclease A by differential thermal analysis and susceptibility to proteolysis: B.G. Winchester, et al.; Biochem J. 117, 299 (1970),
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
包裝
ENZ-51027-K400
PROTEOSTAT® 熱位移穩(wěn)定性分析試劑盒
PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit
400 tests
ENZ-51027-K100
100 tests
◆相關產(chǎn)品
PROTEOSTAT® Protein aggregation assay
PROTEOSTAT®蛋白聚集分析試劑盒
用于可見及亞可見顆粒蛋白質聚集的定量檢測
ENZ-51023-KP002 96 tests×2
ENZ-51023-KP050 50 tests
PROTEOSTAT® Protein aggregation standards
PROTEOSTAT®蛋白聚集檢測標準品
市售蛋白質聚集測定標準品
ENZ-51039-KP002 2x96 wells
PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit
PROTEOSTAT®熱轉移穩(wěn)定性測定試劑盒
用于與pH、離子強度和濃度關聯(lián)的蛋白質穩(wěn)定性快速篩選。
ENZ-51027-K400 400 tests
ENZ-51027-K100 100 tests
PROTEOSTAT® Protein refolding and aggregation sensing kit
PROTEOSTAT® 蛋白質重折疊和聚集敏感試劑盒
用于確定蛋白質重折疊適宜條件和功能蛋白較大回收率
ENZ-51040-KP002 2x96 wells
Protein A ELISA kit
蛋白A ELISA試劑盒
靈敏的監(jiān)測污染殘留用比色法酶聯(lián)免疫試劑盒(9.01 pg/ml)
ADI-900-057 96 wells
E. coli host cell protein ELISA kit
大腸桿菌宿主細胞蛋白ELISA試劑盒
靈敏的定量檢測大批量大腸桿菌系表達產(chǎn)品的宿主細胞蛋白污染(30 ng/ml)
ENZ-KIT127-0001 96 wells
E. coli host cell protein standards
E. coli 宿主細胞蛋白標準品
用于蛋白質印跡內(nèi)部對照或ELISA的定量分析的蛋白質標準。
ENZ-PRT121-0050 50 μg
E. coli host cell proteins polyclonal antibody
E. coli宿主細胞蛋白, 多抗
ENZ-ABS262-0100 100 μg
E. coli host cell proteins polyclonal antibody (biotin conjugate)
E. coli宿主細胞蛋白, 多抗 (生物素 標記)
ENZ-ABS263-0100 100 μg
CHO host cell protein ELISA kit
中國倉鼠宿主細胞蛋白ELISA試劑盒
靈敏的定量檢測大批量中國倉鼠(CHO)系表達產(chǎn)品的宿主細胞蛋白污染(10 ng/ml)
ENZ-KIT128-0001 96 wells
CHO host cell protein standards
CHO 宿主細胞蛋白標準品
用于蛋白質印跡內(nèi)部對照或ELISA的定量分析的蛋白質標準。
ENZ-PRT122-0050 50 μg
CHO host cell proteins polyclonal antibody
CHO宿主細胞蛋白, 多抗
ENZ-ABS260-0100 100 μg
CHO host cell proteins polyclonal antibody (biotin conjugate)
CHO宿主細胞蛋白, 多抗 (生物素 標記)
ENZ-ABS261-0100 100 μg
IgG (human) polyclonal antibody
IgG (人), 多抗
ENZ-ABS264-1000 1 mL

 

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