重組蛋白和鏈酶親和素(Streptavidin, SA)

來(lái)源：作者：西寶生物人氣：-發(fā)表時(shí)間：2014-03-20 14:58:00【大中小】

蛋白A、蛋白G和蛋白L是微生物來(lái)源的天然或重組蛋白質(zhì)，可以和哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白結(jié)合。將這些蛋白偶聯(lián)于支持物上，利用親和層析來(lái)純化抗體，也可用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。不同的抗體結(jié)合蛋白與不同的免疫球蛋白的結(jié)合能力并不一樣，它們受到后者的來(lái)源及亞類(lèi)的影響，因此對(duì)于不同的抗體需要選擇不同的抗體結(jié)合蛋白。

蛋白A是葡萄球菌細(xì)胞壁的組成成分，42kD，能特異性的結(jié)合免疫分子的Fc區(qū)，特別是IgG. 有4個(gè)親和結(jié)合位點(diǎn)，耐熱和耐變性劑（4M尿素，6M鹽酸胍）；用途：可以廣泛用于分離不同種屬來(lái)源的哺乳動(dòng)物IgG分子。

蛋白G是G型鏈球菌細(xì)胞壁的組成成分，主要與大多數(shù)哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白的Fc區(qū)結(jié)合，結(jié)合能力大于蛋白A；用途：主要用來(lái)純化不能與蛋白A很好結(jié)合的單抗和多抗。不能結(jié)合人IgM,D,A。

蛋白L源于細(xì)菌Peptostreptococcus，是一種能和廣泛的免疫球蛋白相結(jié)合的蛋白質(zhì)，該蛋白只與抗體的k鏈結(jié)合而不會(huì)影響抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)，這一特性使其與蛋白A或蛋白G相比，能更廣泛地結(jié)合各種來(lái)源及亞類(lèi)的抗體。用途：它不結(jié)合牛、山羊或綿羊來(lái)源的免疫球蛋白，可以用于從添加BSA或FCS的培養(yǎng)液中純化單克隆抗體。

鏈霉親和素(Streptavidin，SA)，是鏈霉菌在培養(yǎng)過(guò)程中分泌的一種蛋白質(zhì)產(chǎn)物。SA的分子量為60Kda，內(nèi)4條序列相同的肽鏈組成。如同親合素一樣，一個(gè)SA分子也能結(jié)合4個(gè)生物素分子，二者親和常數(shù)亦為1015/mol。SA的每條肽鏈含159個(gè)氨基酸殘基，其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比親合素少，因此SA是一種稍偏酸性的蛋白質(zhì)，其pI為5.5，并且不帶糖基。

1．蛋白類(lèi)產(chǎn)品和鏈酶親和素

貨號(hào)	英文名稱	中文名稱	液體規(guī)格	凍干粉規(guī)格	重組產(chǎn)品來(lái)源
188230	Recombinant Protein A	重組蛋白A	1mg/10mg/100mg		E. coli
	應(yīng)用：結(jié)合兔，豬，狗和貓的 IgG，結(jié)合抗體Fc區(qū)，液體濃度：5mg/ml
188241	Recombinant Protein G	重組蛋白G	1mg/10mg/100mg		E. coli
	應(yīng)用：結(jié)合小鼠，人的IgG 亞型(IgG1, IgG2, etc.)，結(jié)合抗體Fc區(qū)，液體濃度6mg/ml
188250	Recombinant Protein A/G	重組蛋白A/G	5mg		E. coli
	應(yīng)用：結(jié)合來(lái)自于兔，小鼠，人或其他哺乳動(dòng)物IgG，結(jié)合抗體Fc區(qū)
188261	Recombinant Protein L	重組蛋白L	1mg/10mg		E. coli
	應(yīng)用：結(jié)合IgG, IgM, IgA, IgE and IgD，結(jié)合抗體kappa輕鏈，液體濃度：5mg/ml
188272	Strepavidin	鏈酶親和素	1mg/10mg
	應(yīng)用：與親和素連接,用于親和層析，液體濃度7-12mg/ml

免疫球結(jié)合蛋白的一般特性

	重組蛋白A	重組蛋白G	重組蛋白 A/G	重組蛋白 L
天然來(lái)源	金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)	鏈球菌(Streptococcus)	N/A	大消化鏈球菌(Peptostreptococcus magnus)
重組產(chǎn)品來(lái)源	E. coli	E. coli	E. coli	E. coli
分子量	44,600	21,600	50,460	35,800
SDS-PAGE	45 kDa	32 kDa	40-45 kDa	36 kDa
免疫球蛋白Ig結(jié)合位點(diǎn)數(shù)	4	2	6	4
白蛋白結(jié)合位點(diǎn)	No	No	No	No
適合結(jié)合pH值	8.2	5	5~8.2	7.5
Ig目標(biāo)結(jié)合區(qū)	Fc	Fc	Fc	kappa輕鏈