ATTO647n(TM)標記賴氨酸葡聚糖

來源：作者：人氣：-發表時間：2020-05-15 13:32:00【大中小】

ATTO647n™ 標記賴氨酸葡聚糖

ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖是由特定葡聚糖片段與ATTO647n衍生物反應而成。ATTO647n屬于新一代紅外光區熒光染料，具有強烈的吸收，優秀的熒光量子產率，光穩定性好，抗臭氧性強和三重態形成少的特點。TdB提供分子量70KDa的ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖。

賴氨酸葡聚糖是由來源于腸系膜白串珠菌的特定葡聚糖片段通過賴氨酸標記而來，然后在溫和的條件下用Atto647n染料標記制得Atto647n標記賴氨酸葡聚糖。經過純化，嚴格控制每個批次的分子量，外觀，溶解度，取代度，PH，游離賴氨酸和游離染料。

產品由相對應的葡聚糖片段相近分子量來標識。例如，Atto647n Lysine dextran 4 的分子量大約是 4000 Da。實際分子量通過GPC檢測確定。來自腸系膜白串珠菌B-512F 的葡聚糖本質上是一種線性α-(1 - 6)鏈接葡萄糖，不過含有較低比例 (2-5%)沿著主鏈分布的 α-(1-3)側鏈。通過GPC, 旋光性，吸光度和其他控制參數來嚴格控制獲得分子量范圍4000到700000Da的葡聚糖片段。

圖 1. ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖的結構式

結構

ATTO647N標記葡聚糖由來源于腸系膜白串珠菌的特定葡聚糖片段通過賴氨酸標記合成而來。接著賴氨酸葡聚糖在溫和的條件下用ATTO647n染料標記制得ATTO647n染料標記賴氨酸葡聚糖。

Atto647n系新一代紅外光區熒光染料，具有吸光性好，熒光量子產率高，光穩定性好，抗臭氧能力強和極少三重態等特點。該染料可用于單分子檢測和高分辨率顯微鏡。該染料為陽離子型，與葡聚糖偶聯時帶+1的正電荷，在pH2 -11范圍內無pH依賴性。Atto647n是兩種性質幾乎相同的異構體的混合物。

Atto647n標記賴氨酸葡聚糖是藍色粉末，易溶于水或電解質。Atto647n標記賴氨酸葡聚糖幾乎不溶于大多數溶劑，例如乙醇、甲醇、丙酮，氯仿，乙酸乙酯等。賴氨酸取代度（DS）介于(mol賴氨酸/mol葡萄糖)，ATTO647n取代度則為0.001-0.01 (mol Atto647n/mol 葡萄糖)。 Atto647n的最大激發波長為646nm，最大發射波長為664nm (圖2)。

圖2. pH7.4的緩沖液中，Atto647n標記賴氨酸葡聚糖70的吸光度和熒光圖譜。激發波長646 nm，發射波長664nm。

光譜數據

ATTO647N標記葡聚糖最大激發波長為646nm，最大發射波長為664nm (pH 7.4)。

儲存和穩定性

雖然ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖穩定性的前瞻性研究未見報道，但根據葡聚糖和，賴氨酸和葡聚糖的碳酰二胺化學鍵以及賴氨酸與Atto647n間的酰胺鍵判斷，該物質具有較好的穩定性。若容器密封完好，室溫干燥條件下，ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖可以穩定保持6年。

應用

ATTO647n標記賴氨酸葡聚糖提供了生物結合和固定工具。適合單分子檢測和高分辨率顯微鏡。

攜帶氨基基團的葡聚糖，作為生物結合和活體固定的工具，對于科學界而言價值非凡。賴氨酸結構中的游離氨基可以與激活的基團以共價鍵結合，例如NHS酯或異氰酸酯，或者，與羧酸通過常規的肽偶聯劑偶聯，例如DCC，HOBt 以及HATU。細胞和組織固定，使組分保持“類活體態”，并保持細胞滲透性，允許抗體可以進入細胞結構內，應用舉例，用于顯微研究和免疫轉染。賴氨酸結合葡聚糖通過與固定劑反應（本文使用的是甲醛或戊二醛），與類似蛋白質和脂質體的生物大分子形成共價交聯，使整個體系和葡聚糖固定。這個在分子成像定性或定量評估生物事件時，具有十分獨特的重要意義。如果沒有固定，在活體系統內的這些結構將迅速分散和分解。Atto647n是一種具有良好組織滲透性的紅移染料。

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