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DNAstable(R) and DNAstable(R) LD 操作手冊 - 西寶生物翻譯整理

來源:作者:人氣:-發表時間:2015-01-23 10:14:00【
DNAstable怎么用?西寶生物翻譯整理了DNAstable 和DNAstable LD的操作手冊供大家參考。
Biomatrica是一家生物穩定技術美國高科技公司。公司位于美國加利福尼亞州的美麗海濱城市圣地亞哥。Biomatrica產品DNAgard Saliva, RNAstable, DNAstable, CloneStab, RNAgard, DNAgard 使研究人員,在例如藥物開發和分子診斷領域,以非常低廉的成本穩定運輸和儲存完整的生物樣品,并在短時間內恢復樣本活性。其Samplematrix®專有核心技術能夠在室溫下穩定和保護生物材料。現在用一個信封就可郵寄過去需要大量干冰才能辦得到的事。此外,該技術也使在室溫下進行許多生物實驗變成了現實。
上海西寶生物提供進口系列生物樣品在室溫(15-28℃)保存的穩定劑DNAstable,可保存生物樣品可長達30年之久。
DNAstable® and DNAstable® LD操作手冊
1、樣品制備
---適用于已純化的DNA,各形式的DNA均可在DNAstable保護下長期儲存,包括基因組DNA、質粒、寡核苷酸、PCR產物、人工染色體和復雜樣品混合DNA(例如法醫取證DNA和基因鑒定DNA樣品)。
  • 絕大多數標準分子生物學技術市售試劑盒與DNAstable是完全兼容的;為得到較佳效果,DNA樣品必須是已經純化過的,無污染、不含活性DNA酶;
  • 在加入到 DNAstable(干式or管式)之前,純化DNA應懸浮在水或者TE緩沖液(10nM Tris.Cl,1mM EDTA);
  • 加入之前,同樣應該確定DNA樣品濃度;雖然沒有必要,但是任然建議確立一個公式,以便以后的檢索和應用;
  • 為得到較佳效果,每管(孔)DNA質量不應超過30ug,and 不超過50ul。針對寡核苷酸,我們建議每管(孔)20ul保存,濃度≤100μM per oligo(2nmol of each oligo)。
2、樣品干燥和保存
--DNAstable 可以再室溫下保護DNA活性。每個PE管或板孔都含有DNAstable(固定在底部,粉紅色),可以保護皮克和微克級的DNA。DNAstable 是針對液體樣本的應用,基質溶解并在包圍樣品表面形成保護層。then 樣品需要完全干燥以便于在室溫狀態長期保護其活性穩定。
注意:如果后期要使用分光光度計來測量樣品濃度,建議保留一個未使用的的DNAstable 管或者板孔 作為空白對照。
流程:
  • a、確定樣品種DNA數量(μg/ml),并計算出應加入到PE管或者板孔的體積;
  • b、直接加入液體樣品到PE管或者板孔;
  • c、混勻,避免氣泡產生
  • d、室溫(15-25℃)干燥
  • e、室溫儲存干燥的樣品、注意防潮。
建議最終體積不要超過50ul;大體積樣品需要真空干燥以保證完全干燥,我們建議使用自然干燥(層流工作臺)和真空離心干燥,所需時間見下面圖片表格。
注意:干燥需要在室溫下進行,長時間處于潮濕環境會降低產品性能和保護效果。實驗室環境通常保持40-50%的相對濕度,如果超過了這一標準,我們建議您使用真空干燥裝置。
完全干燥后的樣品,需要用鋁箔袋密封。PE管式的產品,蓋子如果沒有受損,也可以保證密封效果。
DNAstable對溫度和濕度敏感,因此建議保存在室溫干燥環境中,長期的暴露在光照環境可能會導致產品變色,但是不影響保護效果。避光可以防止產品變色。
液體DNAstable(DNAstable LD)使用說明
將20ulDNAstable LD加入到1-100ul DNA樣品的水溶液或者緩沖液中(≤30μg).上下顛倒PE管,以混勻,盡量避免產生氣泡。干燥過程見上述。
3、樣品復蘇
流程:
  • a、加入10-100ul體積的水或者緩沖液到干燥的樣品管或者板孔中; 水和緩沖液的種類、體積,根據之前計算出來的DNA質量,和具體的下游應用來計算和選擇;
  • b、室溫存放15min以便完全溶解;
  • c、上下顛倒PE管,混勻樣品,避免氣泡;
  • d、未使用的溶解后樣品可以在4℃存放,或者室溫存放10天。
未使用樣品可以再次干燥并長期存放,不影響樣品穩定性,但是建議溶解并重復干燥次數不要超過3次。

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