GENECLEAN® Turbo Kit 玻璃奶(Glassmilk)法凝膠回收試劑盒
快速回收和濃縮DNA片段,能有效的去除鹽、蛋白質(zhì)、反應(yīng)體系中的限制性內(nèi)切酶或修飾酶
- 高結(jié)合力:柱結(jié)合10ug,常規(guī)為5ug左右
- 高效回收率:大于95%,常規(guī)試劑盒60-90%不等。玻璃奶膜覆蓋于過濾外層,不會造成微粒的流失,保證了回收率,大大高于其他方法。玻璃奶在高鹽和低ph溶液時會優(yōu)先結(jié)合核苷酸,反之可以使核苷酸很快地與玻璃奶分離至低鹽溶液或者水中,保證了高的回收率。
- 片段范圍廣:100bp-300kb,常規(guī)100bp-50kb,回收的片段更為完整,能進行大片段DNA的回收,減少片段的斷裂。而常規(guī)膠回收微粒松散,容易造成多個微粒對大片段的同時吸附造成斷裂。
- 去處雜質(zhì)強:從凝膠或溶液中快速回收和濃縮DNA片段,能有效的去除:瓊脂糖、磷酸酶BAP/CIP/SAP、限制性內(nèi)切酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、Tag聚合酶、末端轉(zhuǎn)移酶、PCR引物/接頭、殘留的有機溶劑、鹽和緩沖液成分、溴化乙錠、激酶、T4連接酶、DNA酶等
- 快速:15分鐘內(nèi)可完整12個樣品的回收,不再需要反復(fù)的沖洗,再也不需要乙醇反復(fù)過柱
- 有效:純化后的樣本下游應(yīng)用效果良好,可用于:測序,克隆,PCR,轉(zhuǎn)化,顯微注射,微陣列分析,轉(zhuǎn)染等。
操作步驟
樣本準(zhǔn)備:含有所需DNA片段凝膠切割或PCR反應(yīng)液體積測定
- 加入Geneclean trubo 鈉鹽溶液,加入比例:膠回收 Geneclean trubo鈉鹽溶液:凝膠= 100ul:100mg ,55℃孵育5分鐘 PCR反應(yīng)液樣本體積的5倍
- 取上一步準(zhǔn)備好的DNA溶液,加入濾芯,室溫14000rpm離心5sec后,清空收集管。控制每次濾芯內(nèi)溶液不多于600ul,如大于600ul,分幾次加入并離心。
加入500ul清洗液,室溫14000rpm離心5sec,清空收集管。
- 室溫14000rpm離心4min。
- 使用1ml的吸頭在#1的位置小心加入樣本液
- 使用注射器或泵(帶有2英寸長,18號或更小鈍角針頭)在#2的位置真空抽出收集管中的液體。
- 取用一個新的收集管,準(zhǔn)備洗脫。加入30ul洗脫液室溫孵育5min,室溫14000rpm離心1min,收集管內(nèi)即為所需的DNA溶液,可用于測序,克隆,PCR,轉(zhuǎn)染等操作。
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