具體的操作步驟如下（以10 mL活化膠偶聯BSA為例）：

1. 清洗：用10-20倍膠體積的去離子水沖洗（大于5次）保存于異丙醇的環氧活化膠，除去異丙醇，抽干，將10 mL（約7.5 g）加入到30 ml的反應器（磨口三角瓶）中，備用。
2. 偶聯：稱取100 mg BSA，溶解于15 mL 0.1 M碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液（pH 10.5），加入到抽干的活化膠中，在搖床上振蕩，37℃偶聯12-24 h；反應完畢后將料液轉移到砂芯漏斗中抽干，收集料液用于未偶聯 BSA的分析和偶聯配基密度的計算，偶聯配基的微球水洗后抽干。其他配基的偶聯方法與BSA類似，但反應條件（pH、溫度、時間、配基加入量）需要根據配基的特性和應用的需求進行適當調整。若配基含有游離巰基，可選用0.1 M硼砂-硼酸緩沖液，pH 8.6，通過巰基進行偶聯。（偶聯注意事項：偶聯氨基可選用pH 9-13的緩沖液，偶聯巰基可選用pH 8.6的緩沖液；避免使用可以和環氧基反應的含氨基的緩沖液，可選用磷酸鹽、碳酸鹽、硼酸鹽和氫氧化鈉溶液；pH越高、溫度越高，偶聯速度越高；時間越長，偶聯反應越徹底，但偶聯條件的選擇還要兼顧配基的穩定性。）
3. 封閉：將10 mL抽干的偶聯BSA的膠加入到100 mL三角瓶中，加入30 mL 1 mol/L乙醇胺，pH 10.5溶液（或0.1 mol/LTris-HCl，pH 10.5）。反應溫度恒定在37℃，攪拌速度120 rpm，反應時間4 h。反應停止后將料液轉移到砂芯漏斗中抽干，用去離子水清洗。
4. 清洗：偶聯BSA的介質依次用5倍的去離子水、0.1 M 含0.5 M NaCl的乙酸-乙酸鈉緩沖液（pH 4.0）、去離子水、0.1 M 含0.5 M NaCl的硼酸-四硼酸鈉緩沖液（pH 8.0）和去離子水充分洗滌（重復交替清洗3次），抽干，去除未反應的配基。
5. 保存：保存于4℃、20%乙醇溶液中。

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