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基因高效表達試劑盒——西寶生物助科研“快”人一等

來源:作者:人氣:-發表時間:2015-10-10 13:49:00【

原核表達系統的研究在近年來如火如荼,Medline報道了大量使用原核表達獲得有活性的可溶蛋白。2002年,瑞典科學家Torleif在美國冷泉港實驗室出版的《Protein Science》(2002,11:313-321)上發表的《Rapid screening for improved solubility of small human proteins produced as fusion proteins in Escherichia coli》一文揭開了原核高效快速組合篩選表達系統用于蛋白組學研究的序幕。

 

西寶生物隆重推出的原核基因高效快速表達試劑盒,是將九種表達載體包括分泌型、引導分泌型、胞內直接表達型、分子內伴侶協助折疊型、高度穩定伴侶型等系統的多克隆位點統一,同時統一誘導表達劑和培養基,一次可以同時克隆九種載體進行表達篩選,極大地節省寶貴的科研時間。
 
一、產品優勢及特點
西寶生物基因高效快速表達試劑盒采用多系統多載體同時篩選快速表達的策略,像美國Amgen、Gentech、Incyte 等生物技術公司同樣采用這一策略。這一策略的優勢就是快速且成功率高。本系統適合高通量快速篩選大量未知基因,對基因組學和蛋白組學的研究是一個不可缺少的工具。
  1. 提供詳實的操作說明和豐富的參考文獻。
  2. 下游多種親和層析組合方便您快速純化目的蛋白。
  3. 分子內伴侶和分泌表達能極大限度避免包涵體形成,直接獲得有活性可溶蛋白,這一點對于未知基因功能的研究很重要。
  4. 九套高效表達載體同時克隆篩選,極大地節省您寶貴的科研時間。
  5. T7 溶菌酶和lacIq阻遏蛋白能起到嚴格控制誘導前表達的作用,同時強啟動子、高拷貝復制子等方法結合可獲得高達50%的表達量。
  6. 已有400多個基因通過該試劑盒而表達成功。

 

二、產品技術路線
 
三、產品組成:
由于大腸桿菌表達系統遺傳背景清楚、易于大規模發酵等優點,尤其是近年來采用分子內伴侶的技術(如Trx、DsbA 等)使得許多外源基因能在E.coli 里正確折疊,如IL—11、GM—CSF、INF、 Insulin甚至包括結構復雜的tPA 等均可獲得正確折疊的重組可溶性活性蛋白,使得E.coli 高效快速表達系統仍然是分子生物學實驗室一個不可缺少的工具。
西寶生物基因高效快速表達試劑盒包括穿刺菌菌株、抗生素和統一多克隆位點的九種表達載體。用戶只要擴增克隆出一段不帶終止密碼子或者帶終止密碼子的閱讀框編碼基因克隆進九種表達載體,可同時篩選,節省時間。一般兩至三周可以篩選出表達菌株,在此基礎上,進一步根據需要進行實驗室菌株的優化從而成為工程菌株。
九種表達載體包括:pLLP-OmpA、pLLP-STII、pMBP-P、pMBP-C、pET-GST、pET-Trx、pET-His、pTrc-CKS、pET-DsbA,這些表達載體經DNA 序列分析、表達試驗、酶切分析、熱穩定(37℃)等測試,可廣泛使用于各種基因的原核表達。
兩種大腸桿菌菌株:①E.coli JM109;②E.coli BL21(DE3)plysS (注意:E.coli BL21(DE3)plysS 轉化菌可以添加氯霉素)。

 

更多產品說明請參考基因高效快速表達試劑盒介紹

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