LabAssay(TM) ALP LabAssay(TM) 堿性磷酸酶檢測試劑盒
LabAssay™ ALP LabAssay™ 堿性磷酸酶檢測試劑盒
堿性磷酸酶的活性檢測試劑盒，常用于檢測培養的成骨細胞、實驗動物血清和骨組織中的堿性磷酸酶活性。 堿性磷酸酶（ALP）廣泛分布于肝臟、骨和小腸之中。組織中酶活性的變化是成骨等生理現象的重要標志。在骨代謝研究領域被用作骨形成指標之一。
本產品是以對硝基苯磷酸鹽為底物的堿性磷酸酶檢測試劑盒，通過使用酶標儀進行多樣品檢測。
◆檢測原理
堿性磷酸酶存在下，碳酸鹽緩沖溶液（pH 9.8）中的對硝基苯磷酸鹽分解成對硝基苯酚和磷酸，產生的對硝基苯酚在堿性條件下呈黃色。通過測量405 nm處的吸光度，可以計算樣品中的堿性磷酸酶活性。
◆試劑盒性能
檢測范圍：>0.06 mmol/L
標準曲線范圍：0.0625~0.5 mmol/L
重復性：C.V.<10%
樣品：血清（小鼠、大鼠、人）
所需樣品量：20 μL
檢測時間：約20min
檢測波長：405 nm
◆試劑盒組成
| 底物片（溶解時對硝基苯基磷酸二鈉 6.7 mmol/L) | 10 片 |
| 底物溶解buffer （2.0 mmol/L 氯化鎂 含有 0.1 mol/L 碳酸鹽緩沖液 pH 9.8) | 50 mL × 1瓶 |
| 反應終止液（0.2 mol/L氫氧化鈉溶液） | 50 mL × 1瓶 |
| 標準溶液 (0.5 mmol/L 對硝基苯酚溶液） | 5 mL × 1瓶 |
◆標準曲線示例
◆檢測操作方法
根據下表中的條件進行反應。
|
Test
|
標準
|
空白
|
|
|
底物緩沖液
|
100 μL
|
100 μL
|
100 μL
|
|
待測物
|
樣品20 μL
|
標準溶液20 μL
|
蒸餾水 20 μL
|
|
孔板混勻儀中震蕩1 min，37°C下孵育15 min。
|
|||
|
反應終止液
|
80 μL
|
80 μL
|
80 μL
|
|
孔板混勻儀中震蕩1 min，使用酶標儀測量405 nm處吸光度
|
|||
◆數據
加標回收測試
ALP的加標回收測試，將已知含量的標準品加標到人、小鼠、大鼠樣品中，n=2。
人血清樣品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.429
|
－
|
－
|
|
0.097
|
0.527
|
0.098
|
101
|
|
0.197
|
0.587
|
0.158
|
80.2
|
|
0.297
|
0.672
|
0.243
|
81.8
|
|
0.507
|
0.866
|
0.437
|
86.2
|
小鼠血清樣品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.284
|
－
|
－
|
|
0.060
|
0.343
|
0.059
|
98.3
|
|
0.127
|
0.399
|
0.115
|
90.6
|
|
0.251
|
0.507
|
0.223
|
88.8
|
|
0.500
|
0.753
|
0.469
|
93.8
|
大鼠血清樣品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.374
|
－
|
－
|
|
0.060
|
0.439
|
0.065
|
108.3
|
|
0.127
|
0.483
|
0.109
|
85.8
|
|
0.251
|
0.598
|
0.224
|
89.2
|
|
0.500
|
0.855
|
0.481
|
96.2
|
◆稀釋線性度測試
使用隨附的緩沖液制備樣品，使其處于檢測范圍內，用緩沖液連續梯度稀釋4次，并檢測結果。
● 人血清樣品
● 小鼠血清樣品
● 大鼠血清樣品
樣品檢測示例
● 人樣品
|
樣品
|
檢測值 (mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
混合血清，男性
|
0.556
|
0.003
|
0.5
|
|
混合血漿(EDTA)，男性
|
0.07
|
0.001
|
1.2
|
※抗凝固劑的EDTA會產生負誤差，所以請不要使用。
● 小鼠樣品：CD-1(ICR)、雄性、血清
|
樣品
|
檢測值 (mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
No.1
|
0.31
|
0.013
|
4.2
|
|
No.2
|
0.453
|
0.001
|
0.2
|
|
No.3
|
0.495
|
0.015
|
3
|
|
No.4
|
0.442
|
0.013
|
2.9
|
|
No.5
|
0.373
|
0.002
|
0.5
|
● 大鼠樣品：SD、雄性、血清
|
樣品
|
檢測值(mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
No.1
|
0.538
|
0.005
|
1
|
|
No.2
|
0.441
|
0.01
|
2.2
|
|
No.3
|
0.357
|
0
|
0
|
|
No.4
|
0.46
|
0.002
|
0.5
|
|
No.5
|
0.301
|
0.011
|
3.6
|
單位：mmol/L, n=2
產品列表
| 產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 產品等級 |
|
633-51021
|
LabAssay™ ALP
LabAssay™ 堿性磷酸酶檢測試劑盒
|
500 tests
|
for Cellbiology
|
※ 本頁面產品僅供研究用，研究以外不可使用。
 |
 |
 |
| 官網：www.baichuan365.com | 微信服務號：iseebio | 微博：seebiobiotech |
 |
 |
 |
| 商城：mall.seebio.cn | 微信訂閱號：seebiotech | 泉養堂：www.canmedo.com |
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