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Ludger單糖分析

來(lái)源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2015-04-20 13:07:00【大中小】

上海西寶生物科技有限公司是Ludger的中國(guó)區(qū)總代理

提供唾液酸分析產(chǎn)品與方案，咨詢/訂購(gòu)熱線： 400-021-8158

單糖分析是監(jiān)管機(jī)構(gòu)在生物制藥表征的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格指南中提出的一個(gè)要求。單糖分析可用于在藥物開(kāi)發(fā)的各個(gè)階段，作為確定糖基化（N-連接和/或O-連接）類型和糖基化程度的方法。它也可以用于證明在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中多批次之間大量釋放的質(zhì)量控制檢測(cè)的一致性。較廣泛使用的單糖分析方法如下：

通過(guò)輕度酸水解放糖蛋白上的單糖。
釋放的單糖用2-氨基苯甲酸（2-AA）進(jìn)行熒光標(biāo)記。
用HPLC或UHPLC柱對(duì)2-AA標(biāo)記的單糖進(jìn)行定量分析。

LudgerTag™單糖釋放和標(biāo)記試劑盒（貨號(hào)：LT-MONO-96）可以提供所有需要的從糖蛋白釋放中性和氨基單糖以及2-AA標(biāo)記的功能。該試劑盒包含有96個(gè)糖蛋白樣品（可用于每個(gè)大約50 μg的糖蛋白）的試劑和材料。

它包括含6個(gè)單糖單獨(dú)混合的定量標(biāo)準(zhǔn)品。該單獨(dú)混合標(biāo)準(zhǔn)品能校準(zhǔn)試驗(yàn)儀器，從而可以定量的確定糖蛋白的單糖組成。

我們建議用五點(diǎn)校準(zhǔn)曲線為此標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，這在試劑盒說(shuō)明書中有詳細(xì)說(shuō)明。

木糖是一種通常存在于植物和昆蟲(chóng)的單糖，但不是哺乳動(dòng)物或酵母表達(dá)載體的單糖。此試劑盒也包含了木糖。它可以被用來(lái)作為內(nèi)參使用（即在標(biāo)記之前加入到每個(gè)樣品）。這樣能補(bǔ)償樣品在處理過(guò)程中發(fā)生的移液或樣品制備誤差的損失。我們還建議純化糖肽標(biāo)準(zhǔn)品，是LudgerBioQuant™首創(chuàng)量化的標(biāo)準(zhǔn)品，作為陽(yáng)性對(duì)照。

這個(gè)定量標(biāo)準(zhǔn)品（貨號(hào)：BQ-GPEP-A2G2S2-10U）是一個(gè)復(fù)雜的N-連接雙觸角聚糖，終止于兩個(gè)N-乙酰氨基酸。使用此標(biāo)準(zhǔn)品將可以檢查聚糖的釋放、標(biāo)記和回收的有效性，并可以增加您的單糖測(cè)定準(zhǔn)確性。

根據(jù)您實(shí)驗(yàn)室的需求，我們提供兩種色譜柱對(duì)標(biāo)記的單糖進(jìn)行分析。如果使用高效液相色譜法（HPLC），我們建議使用LudgerSep™R2柱（貨號(hào): LS-R2-4.6×150），它能有效的分離在大部分N-連接和O-連接聚糖中存在的七個(gè)主要單糖。如果使用超高效液相色譜（UHPLC），我們建議使用LudgerSep™UR2柱（貨號(hào): LS-UR2-2.1x50），它可在8分鐘內(nèi)分離每個(gè)樣本。參見(jiàn)圖1：

圖1：用LudgerSep UR2 UHPLC色譜柱（貨號(hào): LS-UR2-2.1x50）分離的2-AA標(biāo)記單糖標(biāo)準(zhǔn)品。

以下單糖都在8分鐘內(nèi)出峰：氨基葡萄糖（GlcN），氨基半乳糖（GalN），半乳糖（Gal），甘露糖（Man），葡萄糖（Glc），木糖（Xyl）和巖藻糖（Fuc）

單糖分析相關(guān)產(chǎn)品		咨詢/訂購(gòu)熱：4000218158
商品型號(hào)	英文品名	中文品名	包裝
LT-MONO-96	Monosaccharide Release & Labeling Kit	單糖釋放和標(biāo)記試劑盒	2 Reaction Sets
LS-R2-4.6x150	LudgerSep R2HPLC Column	R2 HPLC 色譜柱	4.6 x 150 mm
LS-UR2-2.1x50	LudgerSep uR2UHPLC Column-monosaccharide	uR2 UHPLC 色譜柱-單糖	2.1x 50 mm
LS-R-BPTX10	LudgerSepR BPT Solvent	10倍BPT溶液	50ml
CM-MONOMIX-10	Mix of six monosaccharide quantitative standards (glucosamine, galactosamine, galactose, mannose, glucose/dextroseand fucose )	6個(gè)單糖混標(biāo)準(zhǔn)品 (葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和巖藻糖 )	10 nmol
BQ-GPEP-A2G2S2	A2G2S2 glycopeptide standard	A2G2S2 糖肽標(biāo)準(zhǔn)品（用于單糖釋放和標(biāo)記過(guò)程）	10 μg