mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基/mESF添加物
用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基
本產(chǎn)品是用于小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基。只需在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加mESF 添加物和LIF后即可進(jìn)行小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)。使用時(shí)無(wú)需添加 FBS 或血清代替品,同時(shí)無(wú)需使用飼養(yǎng)層細(xì)胞。
◆產(chǎn)品
● mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基(編號(hào)No. 136-17805)
● mESF添加物(編號(hào)No. 299-73301)
mESF Supplement A 5ml×1
mESF Supplement B 5ml×1(含有 0.0078% 2-mercaptoethanol)
◆特點(diǎn)
● 無(wú)需FBS 和血清代替品(無(wú)血清培養(yǎng)基)
● 無(wú)需飼養(yǎng)層細(xì)胞
● 低濃度 LIF 下也能維持未分化能力
◆使用方法
● 往 mESF 基礎(chǔ)培養(yǎng)基全量加入各種 mESF Supplement及LIF。
※注 直接將mESF 從現(xiàn)在使用中的培養(yǎng)基移出時(shí),成功移植細(xì)胞數(shù)量有可能性減少。因此,請(qǐng)播種比移植時(shí)更多的細(xì)胞。此外,若不擅長(zhǎng)直接移植,請(qǐng)按照以下順序進(jìn)行馴化。
①播種細(xì)胞時(shí),將使用中的培養(yǎng)基與mESF 培養(yǎng)基以1:1的比例混合。
②在后面的移植階段,將使用中的培養(yǎng)基與mESF 培養(yǎng)基以1:3、 1:7的比例混合,依次增加mESF培養(yǎng)基的用量。
◆小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系的培養(yǎng)
使用本產(chǎn)品培養(yǎng)小鼠 ES細(xì)胞 D3細(xì)胞系傳代至第5代,觀察到細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞繁殖能力、未分化標(biāo)記物。
◆細(xì)胞形態(tài)
觀察到具有小鼠 ES細(xì)胞特有光澤的細(xì)胞集落。
◆細(xì)胞繁殖曲線
使用本產(chǎn)品后的繁殖曲線如下圖。
(培養(yǎng)基組成)
mESF 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各 mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure® LIF
(細(xì)胞播種數(shù))
7,000 cells/well
(使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板)
◆觀察到未分化標(biāo)記物
各種未分化標(biāo)記物(Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1)呈陽(yáng)性。
◆低濃度LIF下的小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系培養(yǎng)
在低濃度LIF下(250, 500units/ml)培養(yǎng)了小鼠ES細(xì)胞D3細(xì)胞系。
◆集落形態(tài)(ALP染色)?細(xì)胞繁殖曲線
細(xì)胞形態(tài)及細(xì)胞繁殖曲線如下圖。
(培養(yǎng)基組成)
mESF基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure® LIF
(細(xì)胞播種數(shù))
7,000cells/well
(使用骨膠原蛋白涂層處理12孔板)
◆ALP染色陽(yáng)性集落形成率
任何LIF濃度下的集落ALP染色幾乎都呈陽(yáng)性。
產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
136-17805 |
mESF Basal Medium |
500ml |
299-73301 |
mESF Supplement Set(×100) |
1set |
199-16051 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
106units |
195-16053 |
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution |
106units×10 |