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PROTEOSTAT(R)熱位移穩定性分析試劑盒

來源:作者:人氣:-發表時間:2023-03-02 15:29:00【
PROTEOSTAT® 熱位移穩定性分析試劑盒
加速蛋白穩定性篩選
● 簡單、靈敏、均相的熒光檢測,無需分離或稀釋樣品
● 可用于加速優化蛋白穩定性條件
● 無需了解蛋白功能或配體結合位點,也可進行配體結合檢測
● 可在較廣的溫度、pH值和離子強度范圍內使用,與常用的緩沖液和輔料兼容
● 為采用多種儀器進行交叉驗證提供一種方便、互補的正交方法
PROTEOSTAT® 熱位移穩定性檢測試劑盒內含有一種檢測蛋白聚集的熒光染料,因此可用于監測系統熱應力條件下的蛋白穩定性。通過熱位移分析,可輕松確定大部分蛋白的聚集溫度。聚集溫度是蛋白穩定性的指標,可用于優化使蛋白聚集最小化的條件,以及鑒定與目標蛋白結合并賦予結構穩定性的配體。配合使用相關的 PROTEOSTAT® 蛋白復性和聚集敏感試劑盒(產品編號:ENZ-51040)可確定合適的蛋白復性條件。增加聚集溫度的優化條件可使蛋白的穩定性有所提升。
圖1. 利用PROTEOSTAT® Thermal shift 穩定性檢測試劑盒分析山羊抗小鼠 IgG(pH=7.4,11.2 mg/mL)的典型結果。使用 RT-PCR 儀器,以 3°C/min 的速率將溫度從30°C升至99°C,同時連續讀取熒光值。藍線表示原始熒光強度數據,紅線表示對應的一階導數曲線,代表熒光強度曲線的斜率。通過一階導數圖,可得出蛋白的聚集溫度(Tagg:斜率最大點)。
PROTEOSTAT® 染料的 Tagg 值不同于 SYPRO® Orange 染料的 Tm 值
圖2. PROTEOSTAT® 染料所得得聚集溫度不同于使用 SYPRO® Orange 染料獲得的熔解溫度。圖2. SYPRO® Orange 染料是一種環境敏感染料,能夠與未折疊蛋白的疏水區結合,用于測量 Tm。T是 Thermal shift 曲線的溫度中點,在溫度中點 T時,樣品中的目標蛋白一半呈現出解折疊狀態,而另一半保持折疊狀態。解折疊不依賴于相鄰蛋白。PROTEOSTAT 是一種分子轉子染料,可與蛋白質聚集體的表面結合。Tagg 是熱聚集曲線的中點。蛋白解折疊后開始聚集,聚集取決于相鄰蛋白。蛋白濃度越高,聚集的趨勢越大。
◆產品詳情
特點
本試劑盒用于監測系統熱應力條件下的蛋白穩定性。
品質保證
每批次 PROTEOSTAT®Thermal shift 穩定性檢測試劑盒的樣品試劑盒均已按照操作手冊中的步驟進行測試。
16 μg/ml β-乳球蛋白的聚集溫度單峰位于76°±2°C處。
使用/穩定性
在產品標簽注明的日期前,試劑盒組分在適當的儲存條件下可穩定保存。
 
可存放于-20°C的無霜冰箱中。
儲存條件
避光。避免反復凍融。
運輸方式
干冰運輸
儲存溫度
-20°C
組分
· PROTEOSTAT® TS 檢測試劑
· β-乳球蛋白對照
· 10X 檢測緩沖液
技術信息/產品說明
應用說明:
Prediction of Aggregation Propensity   and Monitoring of Aggregation of Antibody-Drug Conjugates (ADC) using   ProteoStat® Reagents
檢測樣本:
PROTEOSTAT® Cited Samples
Enzo及PROTEOSTAT均為Enzo Life Sciences, Inc. 的商標。Grenier為Grenier Bio-One 的注冊商標。Enzo的部分產品和產品應用受美國、外國專利以及正在申請的專利的保護。本產品由ENZO LIFE SCIENCES, INC. 制造和銷售,僅供研究市場的終端用戶作研究使用,不得用于診斷或治療用途。購買行為不包括在商業上使用、開發或以其他方式利用本產品的任何權利或許可。未經ENZO LIFE SCIENCES, INC. 事先明確書面授權,嚴禁對本產品進行任何商業用途、開發或利用,或使用本產品進行研發。
監管狀態
RUO - 僅供研究使用
◆參考文獻
  1. Constructive approach for synthesis of a functional IgG using a reconstituted cell-free protein synthesis system: S. Murakami, et al.; Sci. Rep. 9, 671 (2019), Application(s): Purified IgG or Trastuzumab,
  2. Structural insights into humanization of anti-tissue factor antibody 10H10: A. Teplyakov, et al.; MAbs. 10, 269 (2018), Application(s): Monoclonal antibodies,
  3. Protein catalyzed capture agents with tailored performance for in vitro and in vivo applications: M.B. Coppock, et al.; Biopolymers 108, e22934 (2017), Application(s): Stability of peptide-based ligands,
  4. Time-Dependent Protein Thermostability Assay: I. Vandecaetsbeek, et al.; Methods Mol. Biol. 1377, 79 (2016),
  5. Effect of Polyethylene Glycol Conjugation on Conformational and Colloidal Stability of a Monoclonal Antibody Antigen-Binding Fragment (Fab'): C. Roque, et al.; Mol. Pharm. 12, 562 (2015),
  6. Modulating the thermostability of Endoglucanase I from Trichoderma reesei using computational approaches: G. Bayram Akcapinar, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 28, 127 (2015),
  7. Site-specific conjugation of monomethyl auristatin E to anti-CD30 antibodies improves their pharmacokinetics and therapeutic index in rodent models: F. Lhospice, et al.; Mol. Pharm. 12, 1863 (2015),
  8. A general approach to antibody thermostabilization: A.D. McConnell, et al.; MAbs 6, 1274 (2014), Application(s): Stability of antibodies,
  9. Modifications of cysteine residues in the transmembrane and cytoplasmic domains of a recombinant hemagglutinin protein prevents cross-linked multimer formation and potency loss: K.M. Holtz, et al.; BMC Biotechnol. 14, 111 (2014),
  10. An integrated approach to extreme thermostabilization and affinity maturation of an antibody: A.D. McConnell, et al.; Protein Eng. Des. Sel. 26, 151 (2013),
  11. Mouse, but not human STING, binds and signals in response to the vascular disrupting agent 5,6-dimethylxanthenone-4-acetic acid: J. Conlon, et al.; J. Immunol. 190, 5216 (2013),
  12. Optimization of protein purification and characterization using Thermofluor screens: S. Boivin, et al.; Protein Expr. Purif. 91, 192 (2013), (Review),
  13. Protein quality control acts on folding intermediates to shape the effects of mutations on organismal fitness: S. Bershtein, et al.; Mol. Cell 49, 133 (2013), Application(s): Aggregation propensity of the DHFR proteins,
  14. Estimation of protein aggregation propensity with a melting point apparatus: A.A. Raibekas; Anal. Biochem. 380, 331 (2008),
  15. Thermofluor-based high-throughput stability optimization of proteins for structural studies: U.B. Ericsson, et al.; Anal. Biochem. 357, 289 (2006),
  16. Structure of the cross-beta spine of amyloid-like fibrils: R. Nelson, et al.; Nature 435, 773 (2005),
  17. Study of the thermal denaturation of ribonuclease A by differential thermal analysis and susceptibility to proteolysis: B.G. Winchester, et al.; Biochem J. 117, 299 (1970),
◆產品列表
產品編號
產品名稱
包裝
ENZ-51027-K400
PROTEOSTAT® 熱位移穩定性分析試劑盒
PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit
400 tests
ENZ-51027-K100
100 tests
◆相關產品
人IgG多抗
 
◆產品詳情
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濃度
1mg/ml
來源
免疫原
人免疫球蛋白G
物種反應性
應用
WB
純化細節
蛋白A親和純化
形式
液體。溶于含有10ppm卡松防腐劑的PBS緩沖液中。
使用/穩定性
在4°C下可穩定1個月,在-20°C下可穩定至少12個月。
處理
避免反復凍融
運輸
冰袋運輸
短期儲存
+4°C
長期儲存
-20°C
監管狀態
RUO - 僅供研究使用
◆產品文獻參考
Th17 micro-milieu regulates NLRP1-dependent caspase-5 activity in skin autoinflammation.; S. Zwicker, et al.; PLoS One 12, e0175153 (2017)
◆產品列表
產品編號
產品名稱
包裝
ENZ-ABS264-1000
人IgG多抗
IgG (human) polyclonal antibody
1 ml
◆相關產品
PROTEOSTAT® Protein aggregation assay
PROTEOSTAT®蛋白聚集分析試劑盒
用于可見及亞可見顆粒蛋白質聚集的定量檢測
ENZ-51023-KP002 96 tests×2
ENZ-51023-KP050 50 tests
PROTEOSTAT® Protein aggregation standards
PROTEOSTAT®蛋白聚集檢測標準品
市售蛋白質聚集測定標準品
ENZ-51039-KP002 2x96 wells
PROTEOSTAT® Thermal shift stability assay kit
PROTEOSTAT®熱轉移穩定性測定試劑盒
用于與pH、離子強度和濃度關聯的蛋白質穩定性快速篩選。
ENZ-51027-K400 400 tests
ENZ-51027-K100 100 tests
PROTEOSTAT® Protein refolding and aggregation sensing kit
PROTEOSTAT® 蛋白質重折疊和聚集敏感試劑盒
用于確定蛋白質重折疊最佳條件和功能蛋白較大回收率
ENZ-51040-KP002 2x96 wells
Protein A ELISA kit
蛋白A ELISA試劑盒
靈敏的監測污染殘留用比色法酶聯免疫試劑盒(9.01 pg/ml)
ADI-900-057 96 wells
E. coli host cell protein ELISA kit
大腸桿菌宿主細胞蛋白ELISA試劑盒
靈敏的定量檢測大批量大腸桿菌系表達產品的宿主細胞蛋白污染(30 ng/ml)
ENZ-KIT127-0001 96 wells
E. coli host cell protein standards
大腸桿菌宿主細胞蛋白標準品
用于蛋白質印跡內部對照或ELISA的定量分析的蛋白質標準。
ENZ-PRT121-0050 50 μg
E. coli host cell proteins polyclonal antibody
大腸桿菌宿主細胞蛋白多抗
ENZ-ABS262-0100 100 μg
E. coli host cell proteins polyclonal antibody (biotin conjugate)
大腸桿菌宿主細胞蛋白多抗(生物素標記)
ENZ-ABS263-0100 100 μg
CHO host cell protein ELISA kit
CHO宿主細胞蛋白ELISA試劑盒
靈敏的定量檢測大批量中國倉鼠(CHO)系表達產品的宿主細胞蛋白污染(10 ng/ml)
ENZ-KIT128-0001 96 wells
CHO host cell protein standards
CHO 宿主細胞蛋白標準品
用于蛋白質印跡內部對照或ELISA的定量分析的蛋白質標準。
ENZ-PRT122-0050 50 μg
CHO host cell proteins polyclonal antibody
CHO宿主細胞蛋白多抗
ENZ-ABS260-0100 100 μg
CHO host cell proteins polyclonal antibody (biotin conjugate)
CHO宿主細胞蛋白生物素標記多抗
ENZ-ABS261-0100 100 μg
IgG (human) polyclonal antibody
人IgG多抗
ENZ-ABS264-1000 1 mL

 

 

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