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Science子刊:開發出一種檢測新冠病毒RNA的雙色RT-LAMP檢測方法

來源:作者:人氣:-發表時間:2020-09-28 09:57:00【

新型冠狀病毒SARS-CoV-2導致2019年冠狀病毒病(COVID-19),如今正在全球肆虐。基于此,人類面臨著一項重大的公共衛生挑戰。快速檢測現有的SARS-CoV-2感染和評估病毒傳播至關重要。

 

Science子刊:開發出一種檢測新冠病毒RNA的雙色RT-LAMP檢測方法

基于逆轉錄環介導等溫擴增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification, RT-LAMP)檢測病毒RNA的方法有潛力成為簡單、可擴展和廣泛適用的檢測方法。與基于逆轉錄定量聚合酶鏈反應(RT-qPCR)的方法相比,RT-LAMP檢測需要在恒溫下孵育,因此無需復雜的儀器設備。

在一項新的研究中,來自德國感染研究中心、德國癌癥研究中心和海德堡大學的研究人員使用了一組針對SARS-CoV-2 N基因的引物測試了用于檢測SARS-CoV-2病毒RNA的雙色RT-LAMP檢測方案。相關研究結果近期發表在Science Translational Medicine期刊上,論文標題為“A colorimetric RT-LAMP assay and LAMP-sequencing for detecting SARS-CoV-2 RNA in clinical samples”。
 
這些作者從正在接受COVID-19測試的個體的768份咽拭子樣本中獲取多余的RNA樣本,并對這些樣本進行RT-LAMP檢測。他們測定了利用RT-LAMP檢測SARS-CoV-2病毒RNA的靈敏度和特異性。

與使用一組高靈敏的引物的RT-qPCR檢測方法相比,這些作者發現RT-LAMP檢測方法能可靠地檢測RT-qPCR測試時循環閾值(Ct)不超過30的SARS-CoV-2 RNA,靈敏度為97.5%,特異性為99.7%。

這些作者還開發了一種不需要事先進行RNA分離步驟的咽拭子直接RT-LAMP(swab–to–RT-LAMP)檢測方法,它保留了優良的特異性(99.5%),但比RT-LAMP檢測的靈敏度低(對RT-qPCR測試時Ct<30的咽拭子樣本而言,靈敏度為86%)。此外,這些作者開發了一種多重測序方法(LAMP-sequencing, LAMP測序)作為診斷驗證程序,以檢測和記錄RT-LAMP反應的結果。
 
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