生物制藥殘留DNA提取試劑盒（碘化鈉法 292-81101）

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-09-12 00:00:00【大中小】

包含疫苗在內的大部分生物藥都是使用培養細胞或大腸桿菌生產的，有研究者指出，通過這種方式生產的原料藥、制劑可能會殘留著宿主細胞來源的DNA。不可否認，宿主細胞或病毒來源的致癌基因很可能會通過這些殘留DNA轉運過來，或引起病毒DNA感染事件。因此，殘留DNA的定量檢測是生物制藥和其工藝驗證中不可或缺的一部分。

有報告建議生物藥中每劑量殘留DNA的含量不超過100 pg，不僅是歐美地區，其他國家也愈發認為必須將定量檢測宿主細胞來源的殘留DNA作為質量檢測項目之一。而檢測這種痕量殘留DNA，則需要從樣品中以高回收率提取痕量殘留DNA。

生物制藥殘留DNA提取試劑盒（碘化鈉法）

殘留DNA提取試劑盒遵照中國藥典記載的碘化鈉法，適用于疫苗和治病用生物制品所含宿主細胞殘余DNA的提取。

殘留DNA提取試劑盒可以提取樣品中含有的極微量的DNA，回收率較高。DNA的提取操作時間為60-90 分鐘。提取的DNA可以通過qPCR進行定量。西寶生物科技（上海）股份有限公司是Wako的授權一級代理，如您對產品感興趣，咨詢訂購熱線：400-021-8158

◆ 原理

1. 試劑盒中包含碘化鈉和表面活性劑N-月桂基肌氨酸鈉。碘化鈉作為蛋白質增溶劑，與表面活性劑一同將樣品中以蛋白質為主的成分轉變為可溶狀態。

2. 通過加入異丙醇，能夠選擇性地令核酸（主要是DNA）和糖原產生沉淀（即共沉淀）。

本試劑盒實現了在不使用固相載體或有機溶劑的情況下，通過簡便的提純步驟獲得了沉淀物，以高回收率提取痕量DNA。

◆ 特點

●　遵照中國藥典登載的碘化鈉法^*
●　高回收率
●　單管操作（無需換管），耗時僅60-90 min
●　不需要苯酚和氯仿等有機溶劑
●　兼容多種DNA

* 為使DNA檢測方法與國際標準保持同步，中國藥典（The Chinese Pharmacopoeia）宣布建立殘留細胞DNA檢測國家標準。碘化鈉法將作為殘留DNA提取方法，被新增至2020版的中國藥典中。

◆ 試劑盒構成

產品編號	內容物	內容量
299-81111	碘化鈉溶液, CP	26 mL
296-81121	N-月桂酰肌氨酸鈉溶液, CP	1.2 mL
293-81131	洗凈液A, CP	42 mL
290-81141	洗凈液B, CP	40 mL×2
297-81151	糖原溶液, CP	0.1 mL

備注：每種成分不單獨出售

◆ 使用方法

過程1

過程2

◆ 應用案例

DNA spiking test（加標回收實驗）

gDNA	E.Coli
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
1,000	939	94
10,000	11,004	110
100,000	100,009	100
1,000,000	969,911	97

gDNA	CHO
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
100	100	100
1,000	979	98
10,000	10,831	108
100,000	90,031	90
1,000,000	1,045,186	105

gDNA	Pichia pastoris GS115
Spike (fg)	Detection (fg)	Recovery (%)
10,000	10,316	103
100,000	94,045	94
1,000,000	1,031,630	103

DNA Extractor™ Kit(292-81101)可以高產量提取殘留DNA，甚至少量殘留DNA。

◆ 產品信息

產品編號	產品名稱	包裝
292-81101	DNA Extractor™ Kit for Residual DNA, CP Method(Sodium Iodide Method) 殘留DNA提取試劑盒（碘化鈉法）	50 tests

◆ 配套qPCR試劑

根據2020版《中國藥典》“外源性DNA殘留檢測第三法（qPCR）”，可選用以下試劑進行下游定量

產品編號	產品名稱	包裝
317-08821	GeneAce Probe qPCR Mix II	50 reactions
313-08823	GeneAce Probe qPCR Mix II	200 reactions

含化學修飾的熱啟動酶及參比染料，適用于Taqman探針法。

◆ Seebio 品牌

含化學修飾的熱啟動酶及參比染料，適用于Taqman探針法。

產品編號	產品名稱	包裝
DAA1098A-1ml	Seebio® 熱啟動Taq酶探針法qPCR預混液(2X)	2×500uL

◆ 其它相關宿主殘留檢測試劑盒

產品編號	產品名稱	包裝
ADI-900-057	Protein A ELISA kit 蛋白A ELISA試劑盒	96 wells
ENZ-KIT127-0001	E. coli host cell protein ELISA kit	96 wells
ENZ-KIT128-0001	CHO host cell protein ELISA kit CHO宿主細胞蛋白ELISA試劑盒	96 wells
ENZ-KIT162-0001	HEK293T宿主細胞蛋白ELISA試劑盒	96 wells