細(xì)菌、真菌高靈敏度檢測試劑 SLP-HS Single Reagent Set II

來源：作者：人氣：-發(fā)表時(shí)間：2020-12-22 15:21:00【大中小】

細(xì)菌、真菌高靈敏度檢測試劑

肽聚糖、β-葡聚糖檢測試劑盒

SLP-HS Single Reagent Set II

用于肽聚糖和(1→3)-β-D-葡聚糖的定量檢測，檢測敏感。

【原理】

蠶（Bombyx mori）的體液內(nèi)存在著被稱為酚氧化酶前體（ProPO）級(jí)聯(lián)的生物防御機(jī)制，通過與肽聚糖（PG）以及（1→3）-β-D-葡聚糖（β-葡聚糖）反應(yīng)，終使酚氧化酶前體（ProPO）活性化為酚氧化酶（PO）。目前已闡明的PO的活化機(jī)制是包含多種絲氨酸蛋白酶活化的級(jí)聯(lián)機(jī)制。目前認(rèn)為該級(jí)聯(lián)機(jī)制在異物入侵昆蟲體內(nèi)時(shí)所觀察到的黑色素形成現(xiàn)象起著重要的作用。

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本SLP試劑采用蠶的體液經(jīng)無菌提取、制備而成的凍干試劑，包含酚氧化酶級(jí)聯(lián)中的因子。本試劑通過被肽聚糖以及β-葡聚糖所活化，從而氧化反應(yīng)底物DOPA（L-3,4-二羥基苯丙氨酸），終生成黑色素。由于大多數(shù)細(xì)菌的細(xì)胞壁存在肽聚糖、β-葡聚糖也存在于多種真菌的細(xì)胞壁中，因此利用生成的黑色素作為指標(biāo)，可檢測出細(xì)菌、真菌。

SLP試劑的活性化機(jī)制如圖1所示。肽聚糖或β-葡聚糖分別與其識(shí)別蛋白（PGRP與βGRP）結(jié)合，引發(fā)酚氧化酶級(jí)聯(lián)，終使PO活化?；钚曰蟮腜O可氧化底物中的DOPA，終生成黑色素。

圖1. 蠶血酚氧化酶前體級(jí)聯(lián)反應(yīng)

肽聚糖不僅存在于革蘭氏陽性菌，也存在于革蘭氏陰性菌中。不管是陽性還是陰性的革蘭氏菌，SLP試劑對一般細(xì)菌均產(chǎn)生反應(yīng)。此外，SLP試劑也會(huì)對真菌來源的β-葡聚糖起反應(yīng)，因此SLP試劑可作用于細(xì)菌、真菌類的微生物。

SLP試劑雖然會(huì)對來源于各類細(xì)菌的肽聚糖和帶有β-1,3-糖苷鍵的β-葡聚糖產(chǎn)生強(qiáng)烈反應(yīng)，但幾乎不與作為革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁成分的脂多糖（內(nèi)毒素）發(fā)生反應(yīng)。能被LAL試劑（鱟試劑）檢測出的內(nèi)毒素不會(huì)使SLP的級(jí)聯(lián)機(jī)制活化，而SLP試劑能檢測無法被鱟試劑檢測出的肽聚糖。因此聯(lián)合鱟試劑與SLP試劑一起使用，可對檢測材料中的微生物種類進(jìn)行預(yù)測。

【特點(diǎn)】

●　配合內(nèi)毒素檢測儀Toxinometer®，可準(zhǔn)確、高靈敏度地定量肽聚糖和β-葡聚糖

【應(yīng)用實(shí)例】

●　檢測醫(yī)藥制品、生物制劑、基因工程制品等中的細(xì)菌、真菌。
●　檢測人工透析液，防止被微生物污染
●　作為水質(zhì)污染的指標(biāo)
●　用于肽聚糖相關(guān)的構(gòu)效關(guān)系、生物合成、代謝、病因生成的研究；
●　用于昆蟲生物防御反應(yīng)機(jī)制的研究

【試劑盒組成】

1.SLP-HS Reagent II　靈敏度：10 pg/mL（肽聚糖），1 pg / mL（β-葡聚糖）	0.1 mL用×20瓶
2.SLP-Diluent（SLP溶解液）	5 mL×2瓶
3.Standard（標(biāo)準(zhǔn)溶液）	0.5 mL×1瓶

※　來源于Staphyrococcus aureus的可溶性肽聚糖標(biāo)準(zhǔn)品，用于細(xì)菌檢測。
如需進(jìn)行真菌檢測，可另行購買凝膠多糖標(biāo)準(zhǔn)品（產(chǎn)品編號(hào)：030-09903）

【測定方法】

通過使用內(nèi)毒素檢測儀Toxinometer®，可定量檢測肽聚糖以及β-葡聚糖。內(nèi)毒素檢測儀Toxinometer® 可檢測由SLP試劑活化生成的色素所引發(fā)的吸光度的變化，當(dāng)吸光度達(dá)到預(yù)設(shè)的閾值時(shí)的反應(yīng)時(shí)間被稱為活化時(shí)間（Ta）。Ta可作為SLP活化物質(zhì)（肽聚糖、β-葡聚糖）的定量指標(biāo)。檢測原理請見圖2，使用內(nèi)毒素檢測儀Toxinometer® 的測定示例請見圖3。

圖2. 檢測原理

利用Toxinometer® 測量從反應(yīng)開始到吸光度R(t)到達(dá)預(yù)設(shè)閾值（Rth）時(shí)的反應(yīng)時(shí)間（Ta），利用不同濃度的肽聚糖、β-葡聚糖對應(yīng)不同的Ta值來進(jìn)行定量。

圖3. 內(nèi)毒素檢測儀Toxinometer® 的測定示例

【產(chǎn)品列表】

貨號(hào)	品名	規(guī)格
296-81001	SLP-HS Single Reagent Set II 高靈敏度SLP試劑盒Ⅱ（獨(dú)立包裝）微生物檢測用	20 tests