人ES/ips 類器官培養 - Y27632，你選對了嗎

來源：作者：人氣：-發表時間：2023-11-28 14:38:00【大中小】

一 Y-27632簡介

Y-27632是一種Rho相關蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制劑，對于p160ROCK的Ki值為140 nM，比對其他激酶，包括PKC、cAMP依賴性蛋白激酶，MLCK和PAK，作用強200倍。Y-27632通過靶向結合ROCK-1/2的催化位點，抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介導的應力纖維的形成，抑制G1-S期細胞周期進程和胞質分裂。此外，Y-27632還能夠通過調節上皮-間充質過渡樣誘導人多能干細胞(hIPSCs)選擇性地分化為間胚層譜系。

Wako Y-27632 （CAS.NO: 331752-47-7）

二多樣的Y-27632

FUJIFILM Wako可提供多種類型的Y-27632產品。請根據用途進行選擇。

Y-27632產品對比表

	Y-27632 (符合GMP標準)	Y-27632, MF	CultureSure® Y-27632	CultureSure® 10mmol/L Y-27632溶液,無動物來源成分
ICH-Q7	√	-	-	-
ISO9001	√	√	√	√
無菌測試	-	-	-	√
活菌數測試	√	√
無動物源性	√	√	√	√
內毒素測試	√	√	√	√
支原體陰性測試	√	√	√	√
粉末/液體	粉末	粉末	粉末	液體（已過濾除菌）
引用文獻※		文獻	文獻	文獻

不同產品應用區別

Y-27632 (符合GMP標準)	符合ICH-Q7（原料藥GMP）標準，可作為再生醫療等產品商業化生產的原材料。采用GMP設備和管理體系進行生產。已進行活菌數測試、內毒素測試、支原體陰性測試、殘留溶劑測試等。按照GMP管理體系進行文件管理在相當于ISO 14644-1 6級的潔凈室中進行分裝使用專用的培養基添加劑生產設備，控制污染風險實施工藝驗證、分析驗證和清潔驗證無動物源性
Y-27632, MF	符合ISO9001管理標準，可用作再生醫療等產品商業化生產的原材料。使用符合自愿性標準的管理設備進行生產。已進行活菌數測試、內毒素測試、支原體陰性測試。使用專用的培養基添加劑生產設備，控制污染風險實施工藝驗證、分析驗證和清潔驗證無動物源性
CultureSure® Y-27632	為藥物發現、再生醫療的基礎研究而開發的無動物源性、符合ISO9001管理標準的產品。已進行內毒素測試、支原體陰性測試。
CultureSure® 10 mmol/L Y-27632溶液，無動物來源成分	為藥物發現、再生醫療的基礎研究而開發的無動物源性、符合ISO9001管理標準的產品。已進行無菌檢測、內毒素檢測、支原體陰性檢測。已經過0.1μm過濾器除菌，可直接加入培養基等產品中使用。

制備各濃度溶液時所需的溶劑量

粉末狀的Y-27632產品已確認可溶于水。制備至所需濃度后，請在過濾滅菌后使用。

關于ES/iPS細胞培養的常規使用方法請參考protocol：

		Y-27632產品（粉末）
		1 mg	5 mg	10 mg
制備后的濃度	1 mmol/L	2.956 mL	14.781 mL	29.562 mL
	5 mmol/L	0.591 mL	2.956 mL	5.912 mL
	10 mmol/L	0.296 mL	1.478 mL	2.956 mL
	50 mmol/L	0.059 mL	0.296 mL	0.591 mL

三、多用途的Y-27632

Y-27632在類器官中的應用

在類器官培養的過程中，離不開Y-27632。Y-27632是一種Rho相關蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制劑，能夠靶向結合ROCK-1和ROCK-2的催化位點，從而抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介導的應力纖維的形成，抑制G1-S期細胞周期進程和胞質分裂。此外，Y-27632能夠通過上皮-間充質過渡樣調節引發人誘導多能干細胞 (hIPSCs) 選擇性地分化為間胚層譜系。

人肝癌類器官已在多項研究中建立，在培養的前2至3周需要Y27632。在組織學水平上，即使經過長期擴展，這些原發性肝癌類器官也能在很大程度上保留其母體腫瘤特征。

Y-27632在人ES/iPS細胞培養中的應用

通過添加Y-27632至培養基中，可抑制人ES細胞或人iPS細胞在細胞分散時的細胞死亡，還可提高凍存后的iPSC存活率。Y-27632是一種選擇性強效ROCK（Rho-associated coiled-coil forming kinase/Rho binding kinase）抑制劑，具有通過ROCK信號傳遞系統收縮血管平滑肌等多種功能。

四、產品列表及相關產品

產品編號	產品名稱	產品規格	產品等級
252-00701	Y-27632(GMP-compliant) Y-27632（GMP標準）	5mg	細胞培養用
258-00703	Y-27632(GMP-compliant) Y-27632（GMP標準）	25mg	細胞培養用
259-00613	Y-27632,MF 選擇性強效ROCK抑制劑	5mg	細胞培養用
257-00614	Y-27632,MF 選擇性強效ROCK抑制劑	25mg	細胞培養用
030-24021	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（選擇性ROCK抑制劑）	1mg	細胞培養用
036-24023	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（選擇性ROCK抑制劑）	5mg	細胞培養用
035-24593	CultureSure®10mmol/LY-27632Solution,Animal-derived-free CultureSure®10mmol/lY-27632溶液，無動物源	1mL	細胞培養用
039-24591	CultureSure®10mmol/LY-27632 Solution,Animal-derived-free CultureSure®10mmol/lY-27632溶液，無動物源	300μL	細胞培養用

相關產品

產品編號	產品名稱	產品規格	產品等級
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)	300 μL	細胞培養用
195-16031	StemSure® Freezing Medium StemSure® 細胞凍存液	100 mL	細胞培養用
EEM0037A	ES專用胎牛血清	500 mL	細胞培養用
064-05381	重組人成纖維細胞生長因子（堿性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，無動物源	50ug	細胞生物學用
068-05384	重組人成纖維細胞生長因子（堿性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，無動物源	100ug	細胞生物學用
060-05383	重組人成纖維細胞生長因子（堿性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，無動物源	1mg	細胞生物學用
ACC0076C	PBS緩沖液	500ml	細胞培養
203-20251	胰蛋白酶EDTA溶液（無酚紅）,AF	100mL	細胞培養