摘要：研究發現 MDA5 蛋白介導的內質網應激 / 未折疊蛋白反應促進血管內皮細胞向間充質細胞轉化。

皮肌炎（Dermatomyositis，DM）是一種特發性炎癥性肌病，常伴有皮膚改變和肌肉無力，在每 10 萬人中約有 20 人患病，每年每 10 萬人中就有 5 - 10 人發病。其中，抗 MDA5 抗體陽性的 DM（MDA5+ DM）是一個獨特的亞型，在中國 DM 患者中，一半左右的患者抗 MDA5 抗體呈陽性。間質性肺?。↖nterstitial lung disease，ILD）是 DM 的嚴重并發癥，一旦患病，患者病情加重，生活質量下降，且 MDA5+DM 患者發生 ILD 的概率更高。同時，MDA5+DM 患者比 MDA5-DM 患者更易出現血管病變，但 MDA5 在血管損傷中的具體作用和機制卻一直不太清楚。

為了解開這些謎團，來自華中科技大學同濟醫學院附屬協和醫院的研究人員展開了深入研究。他們的研究成果發表在《Cell Communication and Signaling》雜志上，為我們認識皮肌炎相關血管損傷的機制提供了新的視角，也為潛在的治療方案提供了方向。

研究人員采用了多種關鍵技術方法。他們回顧性收集了 127 例 DM 患者的臨床資料，通過血清和外周血單核細胞的分離獲取樣本。利用免疫印跡法（Western blotting）、定量實時聚合酶鏈反應（qRT-PCR）檢測蛋白和 mRNA 水平；采用免疫熒光染色觀察蛋白表達和定位；運用免疫沉淀、蛋白質質譜分析來研究蛋白間的相互作用；借助流式細胞術分析細胞相關指標。

在研究結果方面，研究人員發現血管損傷和 ILD 與 DM 患者的抗 MDA5 抗體相關。MDA5+DM 患者中 ILD 的發生率高達 90.6%，而 MDA5-DM 患者中這一比例為 59.7%。疾病活動度評分（DAS）皮膚評分在 MDA5+DM 患者中更高，且 ILD 和 DAS 皮膚評分與抗 MDA5 抗體陽性相關。

進一步研究發現，MDA5+DM 患者的血清可誘導小鼠肺微血管內皮細胞（MVECs）發生 EndMT。與 MDA5-DM 和對照組血清相比，MDA5+DM 血清處理后的 MVECs 中，膠原蛋白 I、纖連蛋白和波形蛋白增加，而內皮標記物 CD31 減少。

研究還揭示了 MAPK - ERK/Snai - 1 信號通路參與了 MVECs 的 EndMT 過程。MDA5+DM 血清增加了 Snai - 1 蛋白和 mRNA 水平，同時顯著提高了 p - ERK 水平。

在對 EndMT 機制的探索中，研究人員發現 TRB3 在 MVECs 中磷酸化 ERK。MDA5+DM 血清處理的 MVECs 中 TRB3 表達增加，且 TRB3 與 ERK 相互作用。通過設計 TRB3 siRNA 進行實驗，發現其可抑制 MDA5+DM 血清誘導的 p - ERK 和 EndMT。

研究人員還發現，持續的內質網應激 / UPR 導致了 TRB3 水平的持續升高。MDA5-DM 血清誘導的 ER 應激可被 UPR 完全緩解，而 MDA5+DM 血清誘導的 UPR 不足，導致持續的 ER 應激，進而使 TRB3 水平持續升高。

深入研究發現，MDA5 蛋白與 PERK 結合導致了持續的 ER 應激 / UPR。免疫沉淀和質譜分析篩選出與 PERK 結合的蛋白，其中 MDA5（IFIH - 1）備受關注。進一步實驗證實 MDA5 與 PERK 相互作用，且 MDA5 的 CTD 結構域與 PERK 的 PKc 結構域相互作用。

圖2 MDA5陽性皮肌炎患者血清可誘導原代小鼠肺微血管內皮細胞發生內皮-間質轉化

此外，研究人員還探索了 MDA5 蛋白表達的原因，發現 T 細胞來源的 IFN - β 促進了 MDA5 蛋白的表達。MDA5+DM 患者外周血單核細胞中 IFN - β 和 IFN - α 的 mRNA 水平增加，且 IFN - β 而非 IFN - α 促進了 MDA5 的表達。

在討論部分，研究人員總結了 MDA5 蛋白在 MDA5+DM 患者肺微血管內皮細胞 EndMT 中的重要作用，這一過程與 MDA5+DM 相關 ILD 密切相關。同時，研究指出 ER 應激在 DM 患者中的發生機制復雜，微環境異常可能是導致 ER 應激的原因之一。EndMT 被認為是內皮細胞損傷后的過度修復過程，與 ILD 和肺纖維化相關，而 TRB3 在不同細胞中可激活不同信號通路，介導 EndMT 或上皮 - 間充質轉化（EMT）。

這項研究為 MDA5+DM 的治療提供了新的思路，支持在疾病早期進行抗纖維化治療，對改善患者的長期生活質量具有重要意義。不過，研究也存在一些局限性，如樣本量不夠大、部分實驗使用小鼠細胞代替人類細胞等，但這并不影響其為后續研究奠定基礎。未來，有望基于這些發現開發出更有效的治療策略，為皮肌炎患者帶來新的希望。

[1] MDA5 protein mediating persistent ER stress/unfolded protein response contributes to endothelial-mesenchymal-transition of lung microvascular endothelial cell in dermatomyositis