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急性腎功能損傷早期檢測NGAL解決方案

2014年08月20日15:10評論:0

急性腎功能損傷早期檢測NGAL解決方案

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL),也稱為Lipocalin-2(脂質運載蛋白-2),是脂質運載蛋白家族的一個新成員,它是腎功能損傷早期的生物標志物。NGAL不僅僅存在于嗜中性粒細胞中,也會出現在特定的上皮細胞內,例如發生缺血性和毒性腎損傷過程中,腎小管上皮細胞中的NGAL將顯著增加,在開 始的兩個小時內,尿液和血液中NGAL水平將顯著增加,因此NGAL是早期急性腎損傷的敏感標志物。臨床研究證明NGAL確診急性腎損傷病人在時間上遠遠早于血清肌酐。

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白快速檢測酶免試劑盒,可用于人尿液、血漿和血清,適用于三聚氰胺(蛋白精)及其它化學物質引發的腎功能損傷早期檢測和藥物代謝的腎損傷研究。本試劑盒在腎損傷發生超過2小時后即可檢測到敏感標志物,以便患者可以及時得到治療。


產品線

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臨床意義

 



急性腎功能損傷過程中NGAL 水平偏高,預后將發展成為急性腎功能衰竭。急性腎功能衰竭(ARF)是心臟手術、腎毒性、腎移植常見的并發癥。NGAL水平偏高通常出以下情況:心血管手 術患者、病危人員、膿血性或出血性休克、腎移植、靜脈X射線造影劑的反應和腎毒性治療反映。50%以上的病人都會出現一定程度的急性腎功能衰竭,通常發病 后期出現使得死亡率大大增加。

急性腎衰竭的預后一直沒有得到改善,在今后的四十年里將引起顯著關注。通用的診斷方法如測定血清肌酐或者半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cystatin C)都只能在腎功能退化后檢測出,那只能損傷后一天甚者幾天內檢測。用NGAL蛋白快速檢測酶免試劑盒,醫生可在損傷幾小時內對急性腎功能障礙做適當的處理。

Bioporto Diadnostics的研究表明,健康志愿者尿液中NGAL含量檢測結果分布0.7-9.6ng/ml,平均值為5.3ng/ml,。而血漿中的含量檢 測結果為37-106ng/ml,平均值為63ng/ml。當腎損傷后,NGAL水平將迅速陡增。隨機檢測重病患者,尿液NGAL的濃度為110ng /ml 到40000ng/ml不等。而他們EDTA抗凝血漿檢測結果為25ng/ml到3491ng/ml。根據急性腎衰竭患者檢測的90%陽性預測值判斷,尿 液中NGAL的陽性判斷值為350ng/ml,而血漿檢測的陽性判斷值為400ng/ml。

試劑盒特異性
在標準實驗室內,使用常規的ELISA設備即可在1個小時內得到檢測結果。所有的組分物質需4℃保存,孵育操作室溫即可。該試劑盒提供即用型的標準品、試劑和包被好的板條,可節省操作的時間,操作簡單,分析快捷,且操作可重復性好。

●一小時快速分析方式
●歐盟體外診斷(CE-IVD)標志
●可檢測尿液,血漿和血清
●可重復性操作好,使用方便
即用的標準品和稀釋液
包被好的ELISA板
室溫孵育
所有的組分可在4度保存
●僅需要常規的ELISA設備即可。

試劑盒組成
1、 包被的可拆式12*8酶標板--96孔
2、 5×樣品稀釋濃縮液--1*60ml
3、 NGAL標準品1-6,每個瓶子上標簽上均標有鑒定的準確濃度--6*1ml
4、 25×清洗濃縮液--1*30ml
5、 HRP標記的NGAL抗體--1*6ml
6、 TMB緩沖液--1*12ml
7、 終止液--1*16ml
8、 聚丙烯U型板(樣品稀釋板)--96孔

操作流程
1.熟悉實驗操作protocol,準備酶標儀450nm,650nm(非必須)或620nm(非必須),空白對照請加50ul樣本稀釋液。
2.用稀釋板稀釋樣本,1:100的血清和血漿稀釋,1:50的尿液稀釋,混勻
3.NGAL標準蛋白,每孔50ul,至于稀釋板中
4.HRP-NGAL:每個反應孔加樣50ul,用多道移液器將稀釋板中的樣本和標準蛋白50ul移至反應板中。
5.酶標板加蓋后,室溫孵育30min,200/minute搖勻。
6.甩盡ELISA板內溶液,用清洗液清洗三次,300ul每孔,甩干后在紙上拍干,最后一次清洗請浸泡1min。充分的清洗是為了最后的顯色。手動加樣,比較溫和,有時容易引起高背景,可以用多道移液器清洗,也可以使用洗板機進行清洗。
7.用多道移液器加TMB顯色液100ul至每個反應孔,開始加樣,請定時15min,加樣結束后蔽光室溫孵育15min。
8.加100ul終止液結束反應,輕輕搖勻20sec,避免溢出,在30min內讀數。

9.酶標儀450nm吸光度讀取OD值,參比波長650nm或620nm,如果沒有,可以參考空白對照值。

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