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急性腎功能損傷早期檢測(cè)NGAL解決方案

產(chǎn)品編號(hào)：發(fā)表日期：2014-08-20 15:10:00

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白快速檢測(cè)酶免試劑盒，可用于人尿液、血漿和血清,適用于三聚氰胺（蛋白精）及其它化學(xué)物質(zhì)引發(fā)的腎功能損傷早期檢測(cè)和藥物代謝的腎損傷研究。

咨詢電話： 400-021-8158

詳細(xì)信息

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL），也稱為L(zhǎng)ipocalin-2（脂質(zhì)運(yùn)載蛋白-2），是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白家族的一個(gè)新成員，它是腎功能損傷早期的生物標(biāo)志物。NGAL不僅僅存在于嗜中性粒細(xì)胞中，也會(huì)出現(xiàn)在特定的上皮細(xì)胞內(nèi)，例如發(fā)生缺血性和毒性腎損傷過(guò)程中，腎小管上皮細(xì)胞中的NGAL將顯著增加，在開(kāi) 始的兩個(gè)小時(shí)內(nèi)，尿液和血液中NGAL水平將顯著增加，因此NGAL是早期急性腎損傷的敏感標(biāo)志物。臨床研究證明NGAL確診急性腎損傷病人在時(shí)間上遠(yuǎn)遠(yuǎn)早于血清肌酐。

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白快速檢測(cè)酶免試劑盒，可用于人尿液、血漿和血清，適用于三聚氰胺（蛋白精）及其它化學(xué)物質(zhì)引發(fā)的腎功能損傷早期檢測(cè)和藥物代謝的腎損傷研究。本試劑盒在腎損傷發(fā)生超過(guò)2小時(shí)后即可檢測(cè)到敏感標(biāo)志物，以便患者可以及時(shí)得到治療。

產(chǎn)品線

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貨號(hào)	品名	檢測(cè)種屬	樣本	檢出限
KIT 036	NGAL ELISA Kit	人	尿/血清/血漿/組織提取物/細(xì)胞培養(yǎng)物	10-1000 pg/mL
KIT 037RUO	NGAL Rapid ELISA Kit	人	尿/血清/血漿	0.2-20 ng/mL
KIT 042	Mouse NGAL ELISA kit	小鼠	尿/血清/血漿/組織提取物/細(xì)胞培養(yǎng)物	10-1000 pg/mL
KIT 043	Dog NGAL ELISA kit	狗	尿/血清/血漿/組織提取物/細(xì)胞培養(yǎng)物	4-400 pg/mL
KIT 044	Pig NGAL ELISA Kit	豬	尿/血清/血漿/組織提取物/細(xì)胞培養(yǎng)物	10-400 pg/mL
KIT 046	Rat NGAL ELISA kit	大鼠	尿/血清/血漿/組織提取物/細(xì)胞培養(yǎng)物	4-400 pg/mL

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臨床意義

急性腎功能損傷過(guò)程中NGAL 水平偏高，預(yù)后將發(fā)展成為急性腎功能衰竭。急性腎功能衰竭（ARF）是心臟手術(shù)、腎毒性、腎移植常見(jiàn)的并發(fā)癥。NGAL水平偏高通常出以下情況：心血管手術(shù)患者、病危人員、膿血性或出血性休克、腎移植、靜脈X射線造影劑的反應(yīng)和腎毒性治療反映。50%以上的病人都會(huì)出現(xiàn)一定程度的急性腎功能衰竭，通常發(fā)病后期出現(xiàn)使得死亡率大大增加。

急性腎衰竭的預(yù)后一直沒(méi)有得到改善，在今后的四十年里將引起顯著關(guān)注。通用的診斷方法如測(cè)定血清肌酐或者半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cystatin C)都只能在腎功能退化后檢測(cè)出，那只能損傷后一天甚者幾天內(nèi)檢測(cè)。用NGAL蛋白快速檢測(cè)酶免試劑盒，醫(yī)生可在損傷幾小時(shí)內(nèi)對(duì)急性腎功能障礙做適當(dāng)?shù)奶幚怼?br />
Bioporto Diadnostics的研究表明，健康志愿者尿液中NGAL含量檢測(cè)結(jié)果分布0.7-9.6ng/ml，平均值為5.3ng/ml，。而血漿中的含量檢測(cè)結(jié)果為37-106ng/ml，平均值為63ng/ml。當(dāng)腎損傷后，NGAL水平將迅速陡增。隨機(jī)檢測(cè)重病患者，尿液NGAL的濃度為110ng /ml 到40000ng/ml不等。而他們EDTA抗凝血漿檢測(cè)結(jié)果為25ng/ml到3491ng/ml。根據(jù)急性腎衰竭患者檢測(cè)的90%陽(yáng)性預(yù)測(cè)值判斷，尿液中NGAL的陽(yáng)性判斷值為350ng/ml，而血漿檢測(cè)的陽(yáng)性判斷值為400ng/ml。

試劑盒特異性

在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，使用常規(guī)的ELISA設(shè)備即可得到檢測(cè)結(jié)果。所有的組分物質(zhì)需4℃保存，孵育操作室溫即可。該試劑盒提供即用型的標(biāo)準(zhǔn)品、試劑和包被好的板條，可節(jié)省操作的時(shí)間，操作簡(jiǎn)單，分析快捷，且操作可重復(fù)性好。

試劑盒組成

1、包被的可拆式12*8酶標(biāo)板--96孔
2、 5×樣品稀釋濃縮液--1*60ml
3、 NGAL標(biāo)準(zhǔn)品1-6，每個(gè)瓶子上標(biāo)簽上均標(biāo)有鑒定的準(zhǔn)確濃度--6*1ml
4、 25×清洗濃縮液--1*30ml
5、 HRP標(biāo)記的NGAL抗體--1*6ml
6、 TMB緩沖液--1*12ml
7、終止液--1*16ml
8、聚丙烯U型板（樣品稀釋板）--96孔

操作流程

1、熟悉實(shí)驗(yàn)操作protocol，準(zhǔn)備酶標(biāo)儀450nm，650nm（非必須）或620nm（非必須），空白對(duì)照請(qǐng)加50ul樣本稀釋液。

2、用稀釋板稀釋樣本，1：100的血清和血漿稀釋，1：50的尿液稀釋，混勻

3、NGAL標(biāo)準(zhǔn)蛋白，每孔50ul，至于稀釋板中

4、HRP-NGAL：每個(gè)反應(yīng)孔加樣50ul，用多道移液器將稀釋板中的樣本和標(biāo)準(zhǔn)蛋白50ul移至反應(yīng)板中。

5、酶標(biāo)板加蓋后，室溫孵育30min，200/minute搖勻。

6、甩盡ELISA板內(nèi)溶液，用清洗液清洗三次，300ul每孔，甩干后在紙上拍干，最后一次清洗請(qǐng)浸泡1min。充分的清洗是為了最后的顯色。手動(dòng)加樣，比較溫和，有時(shí)容易引起高背景，可以用多道移液器清洗，也可以使用洗板機(jī)進(jìn)行清洗。

7、用多道移液器加TMB顯色液100ul至每個(gè)反應(yīng)孔，開(kāi)始加樣，請(qǐng)定時(shí)15min，加樣結(jié)束后蔽光室溫孵育15min。

8、加100ul終止液結(jié)束反應(yīng)，輕輕搖勻20sec，避免溢出，在30min內(nèi)讀數(shù)。

9、酶標(biāo)儀450nm吸光度讀取OD值，參比波長(zhǎng)650 nm或620nm，如果沒(méi)有，可以參考空白對(duì)照值。

西寶生物可以提供NGAL相關(guān)抗體：

貨號(hào)	品名	純度	應(yīng)用	規(guī)格
EDD0011A	中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載酯蛋白NGAL	>90%	抗原，用于ELISA、Western blot、乳膠增強(qiáng)免疫比濁等實(shí)驗(yàn)。	1mg
DCT0039A	NGAL檢測(cè)用單克隆抗體	>90%	可用作包被抗體，也可用作檢測(cè)抗體。用于ELISA、Western blot、乳膠增強(qiáng)免疫比濁等實(shí)驗(yàn)。	1mg
DCT0044A	NGAL檢測(cè)用單克隆抗體	>90%	可用作包被抗體，也可用作檢測(cè)抗體。用于ELISA、Western blot、乳膠增強(qiáng)免疫比濁等實(shí)驗(yàn)。	1mg
DCT6643A	NGAL兔多克隆抗體	>90%	用作包被抗體。用于ELISA、Western blot、乳膠增強(qiáng)免疫比濁等實(shí)驗(yàn)。	1mg