黃曲霉毒素具有較強致癌性,它們是一類真菌(如寄生曲霉和黃曲霉等)的有毒代謝產物,主要存在于藥材、谷物、堅果、棉籽以及動物飼料等中。毒素遠高于氰化物、砷化物和有機農藥的毒性,其中以B1毒性較大。當人攝入量大時,可發生急性中毒,出現急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。近年來為了加強對中藥材的質量控制,根據國家食品藥品監督管理局的部署和安排,經國家藥典委員會有關單位和專家對中藥材中真菌毒素的研究,擬在2010版中國藥典的基礎上,進一步增加中藥的安全性指標控制項目,逐步加強對中藥材中真菌毒素的檢測。2015版中國藥典中無論是中藥材的品種,還是真菌毒素的種類,其相關檢測數量均會增加。針對真菌檢測監控體系的日益完善及其檢測需求的不斷增加,西寶生物近期推出了中藥材中黃曲霉毒素檢測整體解決方案,供廣大實驗者參考。
1、適用范圍適合于陳皮、胖大海、僵蠶、酸棗仁、桃仁等中藥材品種。執行2010版中國藥典附錄IX、V黃曲霉毒素測定法進行檢測。
2、提取步驟取供試品粉末約
混合對照品溶液的制備:精密量取黃曲霉毒素混合標準品(黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2標示濃度分別為1.0µg/ml、0.3µg/ml、1.0 µg/ml、0.3µg/ml)0.5ml,置10ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,作為儲備液。
3、免疫親和SPE柱凈化步驟凈化
1.回溫解凍:提前半個小時將黃曲霉毒素免疫親和柱從冰箱拿出常溫解凍;
2.上樣:準確移取20mL提取好的樣品溶液注入免疫親和柱,使溶液以1滴/S的速度通過免疫親和柱,直至2mL-3mL空氣通過柱體,棄去流出液;
3.淋洗:用20mL水淋洗免疫親和柱,流速為1滴/s---2滴/s,淋洗兩次。直至空氣進入免疫親和柱,直至2mL-3mL空氣通過柱體,棄去全部的流出液,抽干小柱;
4.洗脫:準確加入1.0mL甲醇洗脫,流速約為1滴/s,收集全部的洗脫液于干凈的離心管中,用甲醇-乙腈-水(40: 18: 42)定容至2mL,供液相色譜測定。